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研究背景:越来越多的流行病学调查和动物模型研究表明,产前应激(PS)可能导致抑郁症样行为的后代,并且具有性别特异性。然而,其基本机制尚未阐明。本研究旨在探讨mGluR1和mGluR5基因启动子区甲基化对PS诱导的子鼠抑郁样行为的影响。研究目的:本研究采用束缚应激模型,同时给予5-azaD(5-氮-2′脱氧胞苷,5-aza-2′-deoxy-cytidine,5-azaD,即地西他滨,DNA甲基化转移酶抑制剂),检测一月龄子代大鼠海马体和前额叶皮层mGluRs(mGluR1和mGluR5)及启动子区DNA甲基化的变化,和雌雄子代大鼠之间差异来探讨表观遗传在产前应激对子代抑郁行为影响中的作用机制,为以后的理论研究提供实验依据和理论基础。研究方法:本实验采用成年Sprague-Dawley大鼠(雌性180-230g,雄性230-280g),按雌雄3:1于每晚20:00合笼,第二日早上8:00对交配雌鼠进行阴道涂片检测,在阴道检测到精子反应后将其放入单笼喂养。将怀孕的母代随机分成两组:对照组与产前应激组,在孕晚期即临产前七天举行束缚应激。子鼠产出后第21天母子分离并且依性别分笼。子鼠分组如下;对照组(Control,CON)、产前应激组(Prenatal stress,PS)、产前应激+5-azaD组(PS-5-azaD)产前应激+生理盐水组(PS-Saline),行为学前三天,每天3D立体脑定位对PS子鼠注射等量的5-azaD或Saline。子代大鼠生长到第30天进行行为学测验,采用糖水偏好和强迫游泳检测抑郁样行为,旷场实验检测子代焦虑样行为。运用实时定量PCR方法检测子代大鼠海马体和前额叶皮质mGluR1和mGluR5的mRNA的表达;采取western-blotting的方式检测子代大鼠海马体和前额叶皮质mGluR1和mGluR5的蛋白表达;采用BSP方法检测子代大鼠海马体和前额叶皮质mGluR1和mGluR5的DNA甲基化程度。研究结果:(1)产前应激子代大鼠的抑郁样行为水平较对照组显著升高,而给予5-azaD的产前应激的子代大鼠抑郁样行为水平较应激组显著降低,雌雄子代无明显差异。(2)产前应激子代大鼠的海马和前额叶皮层的mGluR1和mGluR5的mRNA和蛋白表达显著高于对照组,雌雄子代之间有性别差异(p<0.05)。(3)产前应激子代大鼠的海马和前额叶皮层的DNA启动子区甲基化表达显著高于对照组,雌雄子代之间有性别差异(p<0.05)。结论:本课题研究结果发现PS可诱发子代大鼠抑郁和焦虑样行为,可能是由于mGluR1和mGluR5启动子区甲基化修饰升高而引起的。而5-azaD的抗抑郁效应伴随着mGluR1和mGluR5的mRNA表达和蛋白表达的减少和启动子区DNA甲基化的降低,进一步说明了DNA甲基化修饰可能是参与抑郁症发病的重要表观遗传学组成部分。