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目的获得IRS-1表达缺失小鼠,研究IRS-1基因缺失小鼠表型、血糖调节能力及胰岛素敏感性、进食量、骨密度等的变化,并利用IRS-1-小鼠模型探讨IRS-2是否对IRS-1的缺失产生代偿及其可能的机制。方法1.从Jackson Laboratory引进自发性突变致全身IRS-1基因表达缺失的杂合子小鼠,通过杂交及基因鉴定获得IRS-1-/-小鼠,比较IRS-1+/+、IRS-1+/+、IRS-1-/-三种基因型小鼠体重、血糖、进食量及运动量等的差异,microCT骨小梁三维重建分析比较1月龄及1年龄IRS-1-/-小鼠骨微结构变化。2.以骨代谢相关PCR array、旨肪形成相关PCR alTay检测IRS-1-/-小鼠表达显著差异的骨代谢及脂肪形成相关指标,结合miRNA芯片表达谱,找出有明显差异的miRNA及其对应的靶基因。结果1.成功获得三种基因型小鼠,同时发现IRS-1-/-小鼠体型瘦小,约为同窝野生型小鼠的40%-60%,生长发育迟缓,血糖正常,存在胰岛素抵抗,进食量及活动量增加,皮下脂肪含量少,1月龄IRS-1-/-小鼠骨密度下降明显,1年龄IRS-1-/-小鼠骨密度较野生型升高。2.PCR array示IRS-1-/-小鼠部分脂肪形成相关基因显著下调,骨代谢相关基因显著上调；miRNA表达谱分析表明：在IRS.1-/-中有34个miRNA表达上调,18个miRNA表达下调,其中mil-33表达明显下调,其靶分子为IRS-2;而胰岛素信号通路的关键分子PI3K的表达呈现出组织多样性,在肝脏、小肠等组织中表达降低,而在肌肉、脂肪、下丘脑中反而升高,IRS-2在肌肉中表达也升高。结论1.我们成功获得了自发性突变致IRS-1基因表达缺失小鼠。IRS-1缺失使胰岛素敏感性降低,皮下及内脏脂肪明显减少,1月龄纯合子小鼠骨密度下降,而1年龄纯合子小鼠骨密度增加。2.IRS-1信号通路缺失可由miR-33介导的IRS-2信号通路代偿。