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目的探讨中脑星形胶质细胞源性神经营养因子(mesencephalic astrocytederived neurotrophic factor,MANF)蛋白在慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染者肝脏炎症和纤维化发生发展中的作用及其与临床特点的关系。方法采用相对与绝对定量同位素标记(isobaric tags for relative and absolute quantitation,ITRAQ)蛋白质组学和免疫组化法检测20例不同炎症和纤维化阶段慢性HBV感染者肝脏穿刺组织中MANF蛋白的表达,分析其表达水平与肝脏炎症及纤维化程度的相关性;利用Real-time PCR技术检测正常健康对照(normal healthy controls,HC)、乙型肝炎后肝硬化(liver cirrhosis,LC)患者、慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者及慢性无症状HBV携带者(asymptomatic hepatitis B virus carriers,ASC)外周血白细胞中MANF m RNA水平,运用Spearman秩相关分析其与肝脏疾病进展的关系,运用秩和检验分析其与HBV载量、乙肝病毒表面抗原(hepatitis B virus surface antigen,HBs Ag)定量、乙肝病毒e抗原(hepatitis B e-antigen,HBe Ag)定性、转氨酶水平、总胆红素(total bilirubin,TBIL)水平以及临床病理生理因素的关系。结果①在肝脏组织中,MANF蛋白主要表达于在肝细胞胞质中,其在G1S1组多呈阴性及弱阳性表达,G2S2组多呈弱阳性及阳性表达,G3S3及G4S4组多呈阳性及强阳性表达,其表达水平与肝脏的炎症及纤维化程度呈正相关。②外周血白细胞中MANF m RNA水平在不同诊断分组间的比较:4组之间MANF m RNA的表达水平不全相同(c2=28.171,P=0.00);HC组、ASC组和CHB组MANF m RNA的表达水平均低于LC组(Z=-4.182/-4.313/-2.842,P<0.01);其余任意两组之间比较差异均无统计学意义。③从HC到LC,外周血白细胞中MANF m RNA表达水平逐渐升高,即MANF m RNA水平与肝脏疾病进展正相关(rs=0.376,P=0.00)。④外周血白细胞MANF m RNA水平在不同临床指标分组间的比较:HBs Ag定量<1500IU/ml、(1500-20000)IU/ml及>20000IU/ml 3组间MANF m RNA表达水平差异存在统计学意义(c2=6.297,P<0.05);HBe Ag阳性组MANF m RNA表达水平高于阴性组(Z=-3.265,P<0.01);总胆红素正常组MANF m RNA表达水平低于升高组(Z=-3.446,P<0.01)。结论①与HC相比,慢性HBV感染者不同阶段外周血白细胞中MANF m RNA表达水平均有升高趋势,尤其在LC阶段显著,而MANF基因是从数万个基因中筛选出来的并对内质网(endoplasmic reticulum,ER)应激最敏感的基因,因此进一步验证了慢性HBV感染者体内存在ER应激。MANF的表达量与慢性HBV感染后疾病进展呈正相关,这提示ER应激参与了慢性HBV感染后的疾病进展。②慢性HBV感染后,MANF蛋白表达水平随着肝脏组织的炎症及纤维化程度加重而升高,外周血白细胞中MANF m RNA表达水平随着疾病的进展而升高,证明MANF与慢性HBV感染后肝脏炎症及纤维化进展密切相关。