肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-alpha，TNF-α）作为促炎细胞因子刺激中性粒细胞产生氧自由基，后者又进一步激活巨噬细胞释放炎性因子，形成恶性循环，是细胞因子网络的关键部分。转化生长因子-β1（Transforming growth factor-beta，TGF-β1）可通过诱导纤维母细胞增生、成纤维细胞表型改变、胶原纤维及细胞外基质合成增加等多种机制参与肺的重塑。肺泡巨噬细胞源性TNF-α、TGF-β1与急性肺损伤、肺纤维化的发生发展密切相关。血管活性肠肽（vasoactive intestinal peptides，VIP）和降钙素基因相关肽（calcitonin gene-related peptide，CGRP）是肺内重要的调节肽，对肺内多种细胞具有广泛的调节作用。VIP具有抑制肺泡巨噬细胞吞噬和T淋巴细胞增殖、减少肺炎性介质释放、促进气道上皮的损伤修复、清除氧自由基和抗细胞凋亡等生物学作用；而CGRP可调节肺泡巨噬细胞及外周巨噬细胞MMPs/TIMPs、IL-1等多种炎症因子的分泌。因此，肺内调节肽（VIP、CGRP）可能对巨噬细胞TNF-α和TGF-β1的分泌和表达产生影响。 目的：观察肺内调节肽（VIP，CGRP）对巨噬细胞TNF-α与TGF-β1表达和分泌的影响，并初步探讨其信号转导途径。 方法：（1）VIP对脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）诱导的巨噬细胞TNF-α、TGF-β1表达和分泌的影响：以巨噬细胞（RAW264.7细胞株）为研究对象，采用免疫细胞化学方法检测VIP对LPS诱导的巨噬细胞内TNF-α、TGF-β1的影响；ELISA法检测巨噬细胞培养上清液中TNF-α、TGF-β1含量及VIP的作用；采用RT-PCR法检测巨噬细胞TNF-α和TGF-β1mRNA的表达，并观察PKC阻断剂H-7、PKA阻断剂H-89、CaM阻断剂W-7和MAPK阻断剂PD98059对上述作用的影响；（2）CGRP对LPS诱导的巨噬细胞TNF-α、TGF-β1表达的影响：采用免疫细胞化学方法检测CGRP对LPS诱导的巨噬细胞内TNF-α、TGF-β1的影响；RT-PCR法检测CGRP对LPS诱导的巨噬细胞TNF-α和TGF-β1mRNA表达的作用，并观察H-7、H-89、W-7和PD98059对CGRP作用的影响。 结果： 1.VIP对LPS诱导的巨噬细胞TNF-α、TGF-β1表达和分泌的影响。 （1）免疫细胞化学结果显示：LPS诱导6h巨噬细胞胞浆内棕黄色的TGF-β1、TNF-α颗粒增加；VIP预处理组巨噬细胞胞浆内棕黄色颗粒明显少于LPS组。 （2）ELISA检测结果显示：LPS诱导6h巨噬细胞分泌的TGF-β1、TNF-α明显增加（P<0.01），VIP预处理组可抑制该上调作用（p<0.05）。进一步实验显示，VIP对巨噬细胞TNF-α的作用可被PKC和PKA阻断剂阻断；而VIP对巨噬细胞TGF-β1.的作用可被PKA和CaM阻断剂阻断（P<0.05）。 （3）RT-PCR检测结果显示： LPS时间依赖性（2h、4h、6h、12h、24h）上调巨噬细胞TNF-α mRNA的表达，VIP可逆转该上调作用，并呈剂量相关性（10-10mol/L-10-6 mol/L）。VIP（10-8 mol/L）下调LPS诱导6h巨噬细胞TNF-α mRNA的效应可被H-7、H-89所阻断（P<0.05）。 LPS时间依赖性（2h、4h、6h、12h、24h）诱导巨噬细胞TGF-β1 mRNA的表达上调，且在6h就达到峰值（P<0.05）。VIP（10-8 mol/L）在2h、4h可上调TGF-β1 mRNA的表达，而在6h、12h、24h可减少TGF-β1 mRNA的表达（P<0.05）。 VIP呈剂量依赖性（10-10 mol/L-10-6 mol/L）下调LPS诱导6h巨噬细胞TGF-β1 mRNA的表达。VIP（10-8mol/L）对LPS诱导6h巨噬细胞TGF-β1 mRNA的下调效应可被H-89、W-7所阻断（P<0.05），提示VIP该作用与PKA，CaM途径有关。 2.CGRP对LPS诱导的巨噬细胞产生TNF-α、TGF-β1表达的影响。 （1）免疫细胞化学结果显示：LPS诱导后巨噬细胞胞浆内棕黄色的TGF-β1、TNF-α颗粒增加；CGRP预处理组巨噬细胞胞浆内棕黄色颗粒明显多于LPS组。 （2）RT-PCR检测结果显示： LPS诱导后巨噬细胞TNF-α mRNA的表达明显增加，CGRP预处理呈剂量（10-10mol/L-10-6 mol/L）及时间（2h、4h、6h、12h、24h）依赖性增强该上调作用，CGRP（10-8 mol/L）增加LPS诱导6h巨噬细胞TNF-α mRNA表达的效应可被H-89、W-7及PD98059所阻断（P<0.05），提示CGRP增加LPS诱导的巨噬细胞TNF-α mRNA的胞内信号转导途径与PKA、CaM及MAPK有关。 CGRP预处理呈剂量（10-10mol/L-10-6mol/L）及时间（2h、4h、6h、12h）依赖性增强巨噬细胞TGF-β1 mRNA的表达，该效应可被H-7、H-89、W-7所阻断（P<0.05），提示CGRP上述作用的胞内信号转导途径与PKC、PKA、CaM有关。 结论： 1.LPS能促进巨噬细胞TNF-α、TGF-β1的分泌和表达。 2.VIP可抑制LPS诱导的巨噬细胞TNF-α的分泌和表达，其胞内信号转导途径与PKC、PKA有关。 3.VIP早期促进LPS诱导的巨噬细胞TGF-β1的表达，中后期则抑制TGF-β1的表达，其胞内信号转导途径与PKA，CaM途径有关。 4.CGRP促进巨噬细胞TNF-α的表达，其胞内信号转导途径与CaM、PKA及MAPK有关；CGRP上调TGF-β1的表达，其胞内信号转导途径与PKC、PKA及CaM有关。