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木聚糖酶在植物纤维原料糖化、饲料行业、制浆造纸工业、低聚木糖生产和酿造行业的应用已引起了人们的广泛关注。本文研究了毕赤酵母(Pichia)木聚糖酶活力测定的影响因素、分离纯化及膜浓缩分离等工艺。主要研究结果如下：
3，5-二硝基水杨酸(DNS)法测定木聚糖酶酶活力的建立，该法简便，成本低廉。以540 nm作为检测波长，在线性范围0.3～0.9 mg/mL内拟合得标准曲线。线性方程为：Y=0.0357+1.04604X，(r=0.9994，n=6)，相对标准偏差(RSD)为0.178～0.335％。最佳测定条件为：底物浓度为1％，pH为6.0，温度为70℃，酶促反应时间为10 min，DNS用量为3 mL，DNS显色时间为5 min，酶液量/底物溶液量=1/9。
对Pichia发酵产的木聚糖酶进行分离纯化并对其酶学性质做了研究。粗酶液经硫酸铵分级沉淀，Sephacryl S-100HR凝胶层析获得木聚糖酶粗酶，回收率为30.2％，纯化倍数8.05倍。SDS-PAGE结果表明，该粗酶的相对分子质量为32～36 KDa，属于低分子质量的木聚糖酶。该粗酶体系在55～60℃时较稳定，在pH5～7时较稳定，Ca2+、Zn2+对酶活性有一定的抑制作用，Ba2+、Fe2+对酶活性激活作用较明显。该酶作用于木聚糖的米氏常数Km=6.25 mg/mL和最大反应速度Vmax=9.13μmol/(mL.min)。
通过比较各种膜的通量、除菌效果、透过率，选用截留分子量为0.14μm的陶瓷膜进行发酵液的澄清。同时考察pH、压差、温度等操作参数对通量的影响，确定了膜澄清工艺条件为：pH为6.0，操作压差为0.10 MPa，温度为30℃；纳滤浓缩时操作压力为0.4 MPa，浓缩比为10。在此工艺条件下，平均截留率达99.3％，浓缩收率达90％以上。
根据样品初始pH选择山梨酸钾作为本品防腐剂，最佳稳定剂为D-山梨醇，最适添加量分别为2.5‰和25％。该条件下室温保存一周后几乎没有酶活损失。