【摘 要】
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产肠毒素大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coil,ETEC)是导致动物腹泻的主要致病菌之一,对海豚饲养业造成了严重威胁。一旦其感染细菌性疾病,极易引起大范围的传染,引起海洋哺乳类动物发病甚至死亡,从而造成巨大的经济损失。ETEC可产生多种肠毒素,其中的耐热肠毒素为海豚腹泻的主要致病因素。目前国内外针对养殖海豚的疾病防治措施较少,且由于海豚的特殊性,对养殖池水的杀菌
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产肠毒素大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coil,ETEC)是导致动物腹泻的主要致病菌之一,对海豚饲养业造成了严重威胁。一旦其感染细菌性疾病,极易引起大范围的传染,引起海洋哺乳类动物发病甚至死亡,从而造成巨大的经济损失。ETEC可产生多种肠毒素,其中的耐热肠毒素为海豚腹泻的主要致病因素。目前国内外针对养殖海豚的疾病防治措施较少,且由于海豚的特殊性,对养殖池水的杀菌只能依赖于消毒药。所以无污染性且能代替抗生素用作治疗海洋哺乳类动物细菌性疾病的噬菌体逐步成为研究热点。因此本研究针对海洋日益严重的细菌耐药性问题,在山东省某海洋馆的腹泻海豚粪便中分离出一株大肠杆菌。通过分离培养、16S r DNA鉴定、药物敏感性检测确定该菌为多重耐药耐热肠毒素大肠杆菌。以其为宿主菌,筛选出高效裂解性噬菌体,将其命名为Wilfred。通过研究其生物学特性、全基因组测序及临床试验为大肠杆菌噬菌体的临床应用提供依据。研究结果显示,噬菌体Wilfred的负菌落湿润清澈,边缘规则光滑。最佳感染复数为1,最适温度为20-60℃,最适酸碱度为p H6-9。通过生物信息学分析可知,噬菌体Wilfred的基因组总片段长度为49802 bp,GC含量为51.95%,含有78个ORF阅读框。在已知功能的蛋白中,主要是一些噬菌体头部、尾部蛋白、DNA复制相关蛋白。进化树分析结果显示与Escherichia virus Lambda_2H10的亲缘关系较近。临床试验中,噬菌体Wilfred可治疗小鼠及玛丽鱼的大肠杆菌感染。噬菌体Wilfred宿主清晰,具有可适用于海豚饲养池的温度及酸碱稳定性,能为有效防控海豚饲养过程中耐热肠毒素大肠杆菌感染奠定一定的理论基础。
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