无患子外种皮除草活性研究

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植物是生物活性化合物的天然宝库,从植物中寻找天然活性物质,直接加工成农药来控制有害生物的为害或作为先导化合物进行结构优化合成新型农药,是目前植物源农药研究的热点之一。本文以狗牙根(Cynodon dactylon)、匍匐剪股颖(Agrostis stolonifera)、早熟禾(Poa annua)、红三叶(Trifolium pratense)和结球生菜(Lactuca stiva)为指示植物,研究了无患子外种皮的除草活性及活性物质的提取方法;采用活性追踪方法对无患子外种皮中除草活性物质进行了分离。主要研究结果如下:1.比较了石油醚、乙酸乙酯、95%乙醇和蒸馏水等4种溶剂对无患子外种皮的提取效果,结果表明,95%乙醇的提取率最高,达到37.34%;蒸馏水的提取率为23.48%;乙酸乙酯的提取得率为9.78%;而极性较小的石油醚,其提取物的得率最低,仅为1.00%,因此可以得出提取溶剂的极性大小直接影响着无患子外种皮提取物的提取率。2.室内生物活性测定结果表明,不同溶剂提取的无患子外种皮提取物对单子叶植物匍匐剪股颖(Agrostis stolonifera)和双子叶植物结球生菜(Lactuca stiva)均有一定程度的抑制作用,但活性大小存在差异。乙酸乙酯、95%乙醇和纯水提取物对结球生菜的EC50分别为0.0534g/L~0.0787g/L、0.0861g/L~0.1401g/L和0.2033g/L~0.5264g/L;对匍匐剪股颖的EC50分别为0.0479g/L~0.0721g/L、0.1425g/L~0.2902g/L和0.3258g/L~0.4985g/L;石油醚提取物几乎没有抑制活性。3.采用活性追踪的方法,研究了无患子外种皮提取物的除草活性成分,结果表明,乙酸乙酯提取物的大孔树脂柱层析分离所得50%乙醇流份抑制活性较强,对结球生菜(Lactuca stiva)和匍匐剪股颖(Agrostis stolonifera)的根的生长均具有较高的抑制生长活性,EC50值为0.1358g/L和0.0909g/L。95%乙醇提取物大孔树脂柱层析分离所得50%乙醇流份和70%乙醇流份的抑制活性较强,对结球生菜(Lactuca stiva)和匍匐剪股颖(Agrostis stolonifera)的根的生长均具有较高的抑制生物活性,50%乙醇流份EC50值为0.0760g/L和0.0593g/L;70%乙醇流份的EC50值为0.0638g/L和0.0593g/L。纯水提取物的大孔树脂柱层析分离所得70%乙醇流份抑制活性较强,对结球生菜(Lactuca stiva)和匍匐剪股颖(Agrostis stolonifera)的根的生长均具有抑制活性,EC50值为0.2333g/L和0.0527g/L。4.对活性较好的50%乙醇流份进一步凝胶柱层析分离,甲醇洗脱,所得流份采用薄层分离,用氯仿:甲醇=5:1(V/V)展开。用10%硫酸乙醇溶液显色,合并得到2个流份。进一步采用中压反相柱分离,除草活性测定结果表明,其对匍匐剪股颖的EC50值为0.0455g/L~0.0984g/L,结球生菜的EC50值为0.0492g/L~0.0858g/L,与未分之前50%乙醇流份的EC50值相差不大。
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