KGM-ALG复合益生菌微胶囊的制备及功能评价

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益生菌具有调节肠道菌群平衡,促进营养物质消化吸收等益生功能,被广泛应用于食品等领域,然而,胃酸对益生菌的破坏作用,难以有足够数量的活菌到达肠道发挥其作用。利用微胶囊化技术对益生菌进行包埋,从而增强菌体在不良环境中的存活率。魔芋葡甘聚糖(konjac glucomannan,KGM)是一种天然高分子多糖,具有调节肠道微生物等功能,因此,为了保护益生菌的活性,本实验以魔芋葡甘聚糖和海藻酸钠(sodium alginate,ALG)为壁材制备复合益生菌微胶囊,以期为益生菌微胶囊的产业化提供理论基础。本文主要研究内容如下:1.复合益生菌微胶囊制备工艺及安全性评价:研究表明,KGM和ALG质量分数、水油体积比以及Ca CO3与ALG质量比对包埋率具有较大影响,以此为基础,采用正交试验设计获得了微胶囊制备的工艺条件,在KGM质量分数为0.6%,ALG质量分数为3%,水油体积比为1:3,碳酸钙与ALG质量比为1:3时,微胶囊包埋率为(76.2±5.1)%。通过小鼠喂养试验对经上述优化工艺制备的微胶囊进行了安全性评价,通过检测血清生化指标以及组织病理切片观察,结果表明制备的微胶囊不存在安全性隐患。2.复合益生菌微胶囊表观特征及体外性能评价:上述工艺条件下制备的微胶囊平均粒径为(352.6±9.5)μM,呈球形好且表面光滑;经扫描电镜观察,冷冻干燥后微胶囊呈蜂窝状,表面褶皱,凹陷,外观为球形。将复合益生菌微胶囊在p H为2的胃液中处理120 min益生菌存活率仍维持在(45.65±5.0)%的较高水平,在肠液中处理60 min后,微胶囊裂解,益生菌在肠道中有效释放,活菌数达到(9.35±0.25)Log cfu/g,在模拟连续的胃肠道试验中,微胶囊化的益生菌的活菌数仍能达到(7.57±0.05)Log cfu/g,微胶囊不仅能够提高益生菌在胃液中的存活率,还能够增强益生菌对胆盐的耐受性,且益生菌在60天活菌数仍能达到(7.7±0.3)Log cfu/g,表明微胶囊化益生菌在4℃条件下具有良好的储藏稳定性。3.复合益生菌微胶囊对便秘小鼠的预防作用:将80只BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、酚酞组、益生菌粉组、KGM-ALG复合益生菌微胶囊低剂量组、KGM-ALG复合益生菌微胶囊中剂量组、KGM-ALG复合益生菌微胶囊高剂量组和ALG复合益生菌微胶囊组,连续灌胃14天后,除正常组之外,其它组灌胃洛哌丁胺诱导小鼠便秘。相关便秘指标(首次排便时间、小肠推进率等)的结果显示:KGM-ALG复合益生菌微胶囊中剂量组和KGM-ALG复合益生菌微胶囊高剂量组对缓解小鼠便秘效果更好,对应的首粒排黑便时间分别为(149±10)min和(141±7)min,小肠推进率分别为(62±2)%和(70±4)%。中等剂量的KGM-ALG复合益生菌微胶囊能降低Odoribacter和Alistipes的相对丰度,提高体内乙酸和丁酸等短链脂肪酸的含量,有效缓解小鼠便秘。该研究为KGM-ALG复合益生菌微胶囊推广应用奠定了基础。
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