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目的:研究单独及联合应用血小板衍生生长因子(PDGF—BB)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对体外培养的原代人牙髓干细胞增殖及碱性磷酸酶活性的影响。
方法:体外培养DPSC细胞,免疫组织化学检测确定其细胞表型。用四唑盐(MTT)比色法和碱性磷酸酶(ALP)法检测bFGF、PDGF—BB在不同浓度、不同时间作用下,单独及联合应用对人牙髓干细胞增殖和ALP活性的影响。
结果:细胞增殖:第3天PDGF—BB最大显效浓度为10ng/ml,最小显效浓度为1ng/ml;bFGF最大显效浓度为50ng/ml,最小显效浓度为1ng/ml。PDGF—BB最大最小显效浓度单独作用以及与bFGF联合作用的峰值均位于第9天,bFGF单独作用峰值位于第6天。酶活性:第3天PDGF—BB作用的细胞裂解液吸光度峰值位于0.1ng/ml,细胞培养液吸光度峰值位于1ng/ml。第3天IFGF作用的细胞裂解液吸光度峰值位于1ng/ml,细胞培养液吸光度峰值位于10ng/ml。PDGF—BB(10ng/ml)+bFGF(50ng/ml)或PDGF—BB(1ng/ml)+bFGF(1ng/ml)的吸光度值比对照组显著增高,但是与PDGF—BB或bFGF对人DPSC细胞的单独作用相比,其统计学意义较小。
结论:PDGF—BB与bFGF对人牙髓干细胞增殖都有明显的促进作用,而且二者联合具有协同作用;两种因子对细胞酶活性也都有显著的促进作用,但是二者联合对酶活性没有明显协同作用;这两种因子对细胞增殖与碱性磷酸酶活性的作用结果不同,可能与它们本身的结构、作用方式及DPSC上相应的受体有关。