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目的：探索晚期胰腺癌发生发展的病理机制,研究1255I粒子治疗晚期胰腺癌的机制以及神经生长因子(Nerve growth factor,NGF)与其治疗效果的关系。方法：1.将2011年1月-2014年6月在我院确诊并行手术治疗的58例胰腺癌患者,切除部分肿瘤组织作为实验标本,癌旁组织作为对照。其中男性39例(62.72%),女性19例(37.28%),年龄38-72(57.14±8.82)岁。TNM标准肿瘤分期为Ⅱ期的14例(24.14%),Ⅲ期17例(29.31%),Ⅳ期27例(46.55%),CT所示平均肿瘤大小为22.15±11.04mm。术后病检,高分化17例(29.31%),中分化19例(32.76%),低分化22例(37.93%)。38例(65.52%)有淋巴结转移,20例(34.48%)无淋巴结转移。免疫组化及蛋白质印迹法(western blot)检测肿瘤组织和癌旁组织神经生长因子前体蛋白(Pro-nerve growth factor, proNGF)和NGF的表达,Gel-Pro analyzer 4图像分析系统分析条带的宽度,实验重复三次统计学分析IOD值；2.将2011年1月-2014年5月在我院确诊并行125I粒子组织间植入治疗的54例晚期胰腺癌患者作为胰腺癌组(PCa组),50例健康志愿者为对照(HC组),酶联免疫吸附实验(Enzymelinked Immunosorbent Assay,ELISA)检测胰腺癌患者血清NGF的表达水平,并与相应组织NGF水平进行相关性分析；3.CT测量术前和术后6月肿瘤的最短径,RECIST标准评估治疗的效果。完全缓解、部分缓解和稳定认为治疗有效,病变进展认为治疗无效。分析PCa组患者血清NGF与125I粒子治疗效果的关系,利用ROC曲线研究血清NGF水平对125I粒子植入治疗晚期胰腺癌效果的预测价值;4.建立裸鼠胰腺癌移植瘤模型,计算125I粒子组织间植入治疗的抑瘤率,ELISA检测治疗前后血清NGF及组织NGF的水平,并行统计学分析其相关性。结果：1.免疫组化结果显示,晚期胰腺癌组肿瘤组织NGF的表达呈强阳性,表现为细胞浆棕色染色明显增多,而癌旁组织NGF的表达很低,细胞浆棕色染色较肿瘤组织少。proNGF染色显示癌旁组织细胞胞浆内棕色物质较多,而肿瘤组织胞浆内棕色染色物质较少,说明肿瘤组织proNGF的表达较癌旁组织低。细胞计数结果显示肿瘤组织NGF阳性细胞数为++++,癌旁组织为++,肿瘤组织proNGF阳性细胞数为+,癌旁组织为++++。肿瘤组织NGF阳性细胞数量较癌旁组织高,而癌旁组织proNGF阳性细胞数量较肿瘤组织高,秩和检验显示差异有统计学意义(p<0.001)。Western blot分析显示,肿瘤组织NGF蛋白的表达水平较癌旁组织明显增高,但癌旁组织proNGF的表达水平较肿瘤组织高。半定量Western显示,癌旁组织和肿瘤组织NGF表达的IOD值分别为113.33±8.54和285.00±15.13,差异有统计学意义(P=0.001)。而癌旁组织和肿瘤组织proNGF表达的IOD值分别为245.00±7.55和86.33±7.37,差异有统计学意义(P=0.002)2.总共54例PCa组患者中,6例因为治疗后3月内死亡被排除,3例因为远处转移被排除。最终,45例患者纳入研究。45例患者中,30名男性,15名女性,平均年龄52.07±8.43(41-72)岁。HC组32名男性,18名女性,平均年龄55.23±7.21(42-75)岁。PCa组和HC组的年龄及性别构成没有统计学差异(p>0.05)。研究对象中TNM分期为III期的27例(60%),Ⅳ期18例(40%)。ELISA结果显示,PCa组血清NGF的平均含量为775.60±250.97 pg/ml, HC组血清NGF的平均含量为35.03±25.36 pg/ml。晚期胰腺癌患者血清NGF的含量较健康对照组显著升高,升高幅度约22倍,差异有统计学意义(P<0.0001)。ELISA检测相同患者胰腺癌肿瘤组织NGF,结果显示肿瘤组织NGF的平均含量为1848.61±1426.45 pg/ml。PCa组同一患者血清NGF水平与肿瘤组织NGF水平进行Pearson相关分析,结果显示两者呈正相关(r=0.487,P=0.001)。3.PCa组经125I粒子组织间植入治疗的患者中,14例按RECIST标准判定为治疗有效。其中9例(20.00%)部分缓解,5例(11.11%)病变稳定。其余31例(68.89%)病情进展,判定为治疗无效。治疗有效组的血清NGF平均水平537.42±122.61 pg/ml,治疗无效组的平均水平为883.17±217.79 pg/ml,治疗无效组的NGF水平较治疗有效组高,结果有显著性差异(p<0.05)。4.利用ROC曲线对患者的血清NGF水平及治疗效果进行分析,结果显示ROC曲线下面积为0.945,标准差0.032,95%的可信区间为0.882-1.000。曲线的左上方截断点A敏感度90.30%,特异度85.70%,NGF值为649.59 pg/ml.15位血清NGF≤649.59 pg/ml的患者中,治疗有效的12例,治疗无效的3例。30例血清>648.50ug/ml的患者中,治疗有效的2例,治疗无效的为28例。阳性预测值(可治疗准确率)为80.00%(12/15),阴性预测值(不可治疗准确率)为93.33%(28/30)。4.裸鼠长出肉眼可见肿瘤的时间为7-13 d,平均时间为(9.43±2.17)d。肿瘤生长到体积为1000 mm3的时间为26-38 d,平均时间为(32.21±3.62)d。与基线组比较,术后4周,模型对照组的皮下肿瘤体积不断增加,差异有统计学意义(P<0.001)。而治疗组术后第一周体积与基线比较有增加,但差异没有统计学意义(P=0.363),从术后2周开始体积不断减小,差异有统计学意义(P<0.001)。模型对照组和治疗组的基线的皮下肿瘤体积分别为1009.80±39.21mm3和1018.00±48.33mm3,差异没有统计学意义(P>0.05)。术后4周,模型对照组和治疗组皮下肿瘤的体积分别为1582.60±54.91 mm3和781.80±86.32 mm3,差异有统计学意义(P<0.001)。术后4周,模型对照组的平均瘤重为29.41±2.13 g,治疗组的平均瘤重为16.73±2.08 g,治疗组肿瘤的重量比模型对照组明显减轻,肿瘤质量抑制率为43.11%,P<0.001,差异有统计学意义。建模前、建模后4周和治疗后4周空白对照组血清NGF的水平没有明显变化,模型对照组血清NGF的水平不断增加,治疗组1251粒子内放射治疗后4周血清NGF的水平则较治疗前降低,三次检测的水平分别为11.77±1.64 pg/ml.57.14±10.76 pg/ml和43.37± 5.47 pg/ml,差异有统计学意义(P<0.001)。术后4周模型对照组肿瘤组织NGF的水平为186.84±13.49 pg/ml,而治疗组肿瘤组织NGF的水平为113.46±17.01 pg/ml,治疗组的组织NGF水平比模型对照组明显降低,差异有统计学意义(P<0.001)。模型对照组治疗后4周血清NGF的水平与组织NGF的水平呈正相关,相关系数丫=0.724,P=0.018,相关性有统计学意义。结论：胰腺癌组织NGF增加,proNGF表达减少,这可能是胰腺癌发生发展、浸润转移的致病机制之一。胰腺癌患者血清NGF与组织NGF的水平具有正相关性,对125I粒子植入治疗效果的预测效果较好,因此,血清NGF有可能成为预测晚期胰腺癌1251粒子植入治疗效果的参考标准之一。