背景:2005年，美国M. D. Anderson癌症中心做了一项大样本的回顾分析，发现食用富含植物雌激素的食物可以显著减少患肺癌的风险，尤其是男性和不吸烟者。但是由于存在回忆偏倚以及回顾性研究的缺陷，这项调查并不完善。2010年，日本公共健康中心对36177名男性和40484女性长达11年的前瞻性研究发现，男性不吸烟者，饮食中植物雌激素含量与患肺癌风险呈高度负相关，女性不吸烟者则为弱负相关。2011年，日本JPHC研究组对24,127名女性的前瞻性研究发现，血浆染料木素浓度与女性肺癌发病率呈负相关。以上研究提示了植物雌激素与肺癌之间的密切关系，因此研究植物雌激素对肺癌的治疗作用是一个重要方向。而红车轴草异黄酮是一种抗癌效果较好的植物雌激素混合物，主要包括刺芒柄花素、鹰嘴豆芽素A、染料木素、大豆素，目前在北美和欧洲作为保健品已经上市。但是要将其开发为治疗肺癌的药品，必须阐明其单体对肺癌的作用机制，而红车轴草异黄酮所含单体的分离提纯异常困难，因此，刺芒柄花素的分离提纯是研究其对非小细胞肺癌作用的基础。目的:通过对红车轴草中植物雌激素的提取分离与纯化方法的研究寻找大量提取纯化植物雌激素单体的方法；通过刺芒柄花素血清药理学研究，为药物剂型选择提供理论基础；将刺芒柄花素及刺芒柄花素与顺铂联合应用于A549肺腺癌细胞株，观察刺芒柄花素对A549肺腺癌细胞株的抑制作用及其与顺铂联用的抑制效果。方法:2.5g红车轴草异黄酮粗提取粉溶于甲醇置于蒸发皿，加入6g聚酰胺粉(100目~200目)研磨拌样后干燥，备用。称取50g聚酰胺粉加入双蒸水，搅拌至无气泡，贴壁装入层析柱。分别用双蒸水、无水乙醇淋洗至流出液经紫外分光光度计检测无杂质。干法上样后，分别以双蒸水-10%乙醇-20%乙醇-30%乙醇-40%乙醇-45%乙醇-50%乙醇做为流动相，洗脱液流速为1ml/分钟，洗脱得样品溶液每30ml换瓶。将高效液相分析含量>80%的鹰嘴豆芽素A和刺芒柄花素溶液分别混合，水浴蒸干，备用。选用12周龄清洁级SD成年大鼠24只，雌雄各12只，体重在200-250g之间，随机分为6组，禁食12小时。用灌胃针将配好的刺芒柄花素混悬液(刺芒柄花素480mg、无水乙醇6ml、1,2丙二醇6ml、吐温-806ml、蒸馏水42ml)按照1ml/100g灌胃。将6组大鼠分别在灌胃后的第1h，2h，3h，4h，5h，6h使用乙醚麻醉，经腹主动脉采血，每只大鼠采血量约为5ml。所取6组共24管血液以3000r/min的速度离心15min，取血清。每份血清加其2倍体积的醋酸乙酯，置温水浴超声震荡15min萃取，分液漏斗静置分离，每份血清萃取3次。3次萃取所得的醋酸乙酯溶液混合，挥干后每份加原血清1/5体积的甲醇溶解，高效液相色谱分析。将A549人肺腺癌细胞株培养于含10%小牛血清RPMI1640培养基，接种于100ml培养瓶，培养条件37℃、5%CO2。对数期细胞胰酶消化后铺96孔板，24h贴壁后，将刺芒柄花素培养液、顺铂培养液、刺芒柄花素顺铂混合培养液及对照组共四组培养液加入孔内，每组10孔，另设校正孔。24h后换培养液，48h后用MTT比色法检测吸光度。设对照组抑制率为0，分别计算各组抑制率。结果:最终提纯88.7%的鹰嘴豆芽素A0.05g，76%的鹰嘴豆芽素A0.12g，71.52%的刺芒柄花素0.04g；将刺芒柄花素灌饲后，所采血清中有刺芒柄花素波峰出现，波峰随时间有少许上升，说明刺芒柄花素可以直接吸收入血。刺芒柄花素波峰与染料木素波峰高度差异不大，但灌胃液中刺芒柄花素含量远高于染料木素含量，提示刺芒柄花素的生物利用度可能比较低。刺芒柄花素对A549人肺腺癌细胞株抑制率为（20.4±0.67）%，顺铂组抑制率为（49.7±1.23）%，混合用药组抑制率为（69.4±2.3）%。结论:聚酰胺粉（柱层析用，100~200目）对红车轴草异黄酮粗提取物内四种异黄酮具有较好的分离和提纯效果；大鼠口服刺芒柄花素可以直接吸收入血，但生物利用度可能较低，其具体机制尚需进一步研究。刺芒柄花素对A549人肺腺癌细胞株有较好的抑制作用，同时能够和顺铂起协同抑制作用。