目的:构建人CD80-IgG1Fc融合蛋白的真核表达载体,并转染CHO细胞,建立CHO融合蛋白稳定表达株;探讨经融合蛋白修饰的肝癌细胞H22对淋巴细胞抗肿瘤免疫的影响,及其对肝癌细胞H22皮下移植型荷瘤小鼠肿瘤生长的影响。方法:通过RT-PCR从人外周血单个核细胞中扩增CD80膜外段及IgG1Fc基因,构建真核表达载体CD80-IgG1Fc/pcDNA3.1(+),将其转染CHO细胞株并筛选。通过RT-PCR、Western blot及ELISA鉴定融合基因的表达;将融合蛋白修饰小鼠肝癌细胞株H22,流式细胞术检测细胞膜上CD80的表达,以MTT比色法、乳酸脱氢酶释放试验检测经修饰的H22细胞对脾淋巴细胞增殖及其细胞毒性的影响。建立肝癌细胞H22皮下移植型荷瘤小鼠模型后,接种经融合蛋白修饰的H22细胞,观察其对肿瘤生长的影响。结果:成功构建了真核表达载体CD80-IgG1Fc/pcDNA3.1(+),并获得稳定表达CD80-IgG1Fc融合蛋白的重组CHO细胞株。针对融合蛋白修饰后的H22细胞,脾淋巴细胞增殖较对照组增强,CTL的细胞毒活性增高。荷瘤小鼠接种经融合蛋白修饰的H22细胞后,皮下肿瘤体积在第12天小于对照组。结论:CD80 -IgG1Fc融合蛋白能在CHO细胞中稳定表达;用CD80 -IgG1Fc融合蛋白修饰的H22细胞能促进淋巴细胞活化,诱导特异性抗肿瘤免疫效应,并对体内肿瘤生长有抑制作用。