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2-DG抗痫作用的评价目的：探讨2-DG抗痫作用的疗效。方法：6-8周成年雄性C57BL/6小鼠进行随机分配为对照组、致痫组、2-DG干预组,建立匹罗卡品致痫模型。对不同组行为学的变化进行监测,观察其自发性痫性发作的癫痫潜伏期、癫痫评分、痫性发作持续时间,同时观察不同组脑电图的变化。结果：1.对不同组(对照组、致痫组、2-DG干预组)行为学监测显示：与对照组相比,匹罗卡品致痫后,致痫组、2-DG干预组41.5%的C57BL/6小鼠存在自发性痫性发作。相对于致痫组,中、高剂量2-DG干预组小鼠潜伏期增加,癫痫发作评分、痫性发作持续时间降低(癫痫潜伏期：15±4分钟VS35±4、33±5分钟；癫痫评分为5.1±0.5VS3.9±0.4、3.8±0.5；痫性发作持续时间为122±7分钟VS35±6分钟、42±7分钟),而且有统计学意义。2.对不同组(对照组、致痫组、2-DG干预组)脑电图监测显示：对照组脑电图是以α、β波为主且波幅较小；匹罗卡品致痫模型组可见大量的尖波、棘波和尖慢波：2-DG干预组脑电图是也主要是以α、β波为主且波幅较小。结论：2-DG在匹罗卡品癫痫模型中具有抗痫作用。2-DG上调KATP亚基Kir6.1、Kir6.2发挥抗痫作用目的：研究糖酵解抑制剂2-DG对ATP依赖性钾离子通道亚基Kir6.1、 Kir6.2mRNA和蛋白表达的影响与抗痫作用的关系。方法：1.6-8周成年雄性C57BL/6小鼠进行随机分配为对照组、致痫组、2-DG干预组,建立匹罗卡品致痫小鼠模型。将造模成功的小鼠(致痫组,2-DG干预组)在癫痫持续状态(SE)后4小时、1天、7天、30天、60天和正常生理盐水对照组(各组n=4-6)的海马组织应用Real-time PCR方法检测使用糖酵解抑制剂2-DG前后各组小鼠海马组织中ATP敏感性钾通道亚基Kir6.1、Kir6.2mRNA的变化。2.将造模成功的小鼠(致痫组、2-DG干预组)在癫痫持续状态(SE)后4小时、1天、7天、30天、60天和对照组(各组n=4-6)的海马组织应用western-blot方法检测糖酵解抑制剂2-DG前后各组小鼠海马组织中ATP敏感性钾通道亚基Kir6.1、Kir6.2mRNA蛋白的变化。结果：1.相对于对照组,在第1、7、30天致痫组小鼠海马组织Kir6.1和Kir6.2mRNAs上调,而且有统计学意义；相对于致痫组,在第1、7、30天中、高剂量2-DG干预组海马组织Kir6.1和Kir6.2mRNAs上调,而且有统计学意义。在其它时间点差异不明显。2.相对于对照组,在第1和30天致痫组小鼠海马组织Kir6.1蛋白上调,而且有统计学意义；在第1、7天致痫组小鼠海马组织Kir6.2蛋白上调,而且有统计学意义；相对于致痫组,在第1天中、高剂量2-DG干预组海马组织Kir6.1蛋白上调,而且有统计学意义。在第1、7、30天中、高剂量2-DG干预组海马组织Kir6.2蛋白上调,而且有统计学意义。在其它时间点差异不明显。结论：糖酵解抑制剂2脱氧葡萄糖上调KATP亚基Kir6.1、Kir6.2mRNA和蛋白表达发挥抗痫作用。2-DG经KATP通道抗痫作用机制体外实验研究目的：探讨2-DG经KATP通道抗痫作用的机制方法：1.在体外海马脑片CA3区,给予10uM荷包牡丹碱、7.5mM高钾模拟痫性发作,诱发动作电位频率增加,应用盲法膜片钳技术监测使用10mM2-DG前后神经元细胞动作电位频率的变化。2.在体外海马脑片CA3上,高频电刺激诱发LTPGlu模拟致痫模型,记录给予2-DG后海马脑片CA3区神经元LTPGlu(谷氨酸介导突触传递的长时程增强)的变化；给予KATP通道激活剂Diazoxide (300nM),LTPGlu的变化以及在KATP通道抑制剂Gliben (20uM)预处理后给予10mM2DG后LTPGlu的变化。结果：1.在体外海马脑片CA3区上,10mM2-DG降低荷包牡丹碱和高钾致痫模型的动作电位频率。2.在体外海马脑片CA3区上,高频电刺激诱发LTPGlu模拟致痫模型,10mM2-DG阻挡高频电刺激诱发LTPGlu。3. Kir6.2通道激动剂Diazoxide (300nM)阻挡高频电刺激诱发海马CA3区神经元LTPGlu, Kir6.2通道阻断剂Gliben (20uM)拮抗2-DG (10mM)阻挡高频电刺激诱发海马CA3区神经元LTPGlu作用。结论：2-DG在体外脑片致痫模型上具有抗痫作用,其机制是经KATP通道的激活而发挥抗痫作用。2-DG抗痫作用的信号通路研究目的：研究糖酵解抑制剂2-DG抗痫作用的信号通路。方法：1.在体内匹罗卡品致痫模型上,采用Elisa技术记录使用糖酵解抑制剂2-DG前后静脉血中DAG的变化。2.在体外海马脑片上,高频电刺激诱发LTPGlu模拟致痫模型,给予PKC激动剂phorbol(PMA)预处理后,应用盲法膜片钳技术记录给予2-DG前后LTPGlu的变化。结果：1.在体内匹罗卡品致痫模型中,相对于对照组,在第1天致痫组小鼠静脉血DAG上调,而且有统计学意义(p<0.05)；在第7、30、60天致痫组小鼠静脉DAG下调,其中第7、30天致痫组小鼠静脉DAG下调有统计学意义(p<0.05)。2.相对于致痫组,在第1天中、高剂量2-DG干预组小鼠静脉DAG上调,而且有统计学意义(p<0.01)；在第7、30、60天中、高剂量2-DG干预组小鼠静脉DAG下调,其中第7、30天致痫组小鼠静脉DAG下调有统计学意义(p<0.05),在其它时间点差异不明显。3.在体外海马脑片上,PKC激动齐(?)phorbol(500nM)拮抗2-DG(10mM)阻挡高频电刺激诱发海马CA3区神经元LTPGlu作用结论：DAG的下降与2-DG的抗痫作用有关；PKC激动剂能抑制2-DG的抗痫作用。