绞股蓝中商陆苷的提取、纯化及体外活性研究

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商陆苷是绞股蓝中的重要有效生物活性成分,属于黄酮类化合物,其生理活性主要体现在抗过敏、抗癌、抗菌消炎、抗衰美容等。本文对绞股蓝中商陆苷的提取、纯化、体外活性及商陆素的提取进行研究。  第一部分:绞股蓝中商陆苷和商陆素的提取工艺研究  以绞股蓝为实验药材,选取甲醇为提取试剂,通过单因素实验和正交实验分别考察了加热回流法、索氏提取法和微波辅助法三种方法,得到提取商陆苷最佳工艺条件,得到加热回流水解商陆苷制取商陆素的最佳工艺条件。  加热回流提取商陆苷的最佳工艺条件为:提取时间2.5 h,甲醇浓度100%,料液比1:20(g/mL),提取1次,商陆苷的提取量0.413 mg/g。微波辅助提取商陆苷的最佳工艺条件为:萃取功率800W,提取时间10 min,料液比1:15(g/mL),提取2次,商陆苷的提取量0.773mg/g。索氏提取法最佳工艺条件:提取时间3 h,料液比1:45(g/mL),提取3次,商陆苷的提取量0.586 mg/g。  加热回流水解提取商陆素的最佳工艺条件为:盐酸浓度3 mol/L,溶剂体积30 mL,水解时间2.5 h,水解1次。商陆素的提取量0.357 mg/g。  第二部分:商陆苷的纯化及结构确认  采用高速逆流色谱法分离纯化绞股蓝粗品中的商陆苷。粗品中商陆苷的含量为1.72%,经乙酸乙酯萃取后,商陆苷的含量提高到2.16%。选取双相溶剂体系:正己烷-乙酸乙酯-乙醇-水(5:6:5:5, v/v),柱温25℃,采用从头到尾洗脱方式,流动相的流速1.5 mL/min,转速850r/min,检测波长280nm。进样210mg,获得商陆苷3.9mg,纯度96.7%。通过熔点测定、质谱、红外、核磁共振氢谱等表征手段对目标物进行了结构确认。  第三部分:商陆苷纯品的抗氧化活性研究  研究了商陆苷纯品对DPPH自由基和羟基自由基的清除作用。商陆苷对DPPH自由基和羟基自由基具有较好的清除作用,EC50分别为0.221 mg/mL和0.0869 mg/mL。
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