引起长豇豆不同症状的黑眼豇豆花叶病毒两个分离物基因组学研究及其外壳蛋白的原核表达

来源 :华中农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ESC_liangzi
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该研究针对引起长豇豆病毒病的马铃薯Y病毒属成员分别进行了以下工作:1)初步提纯了引起皱缩和黄化两种不同症状的黑眼豇豆花叶病毒两个分离物BICMV-R和BICMV0-Y的病毒粒子,并研究了病毒粒子的特征和它们引起的寄主细胞组织病变.2)设计引物对,对该病毒两个分离物基因组全序列进行扩增,测定了它们的基因组全序列.3)对该病毒两个分离物的基因组核苷酸序列及其推导的氨基酸序列进行了基因组结构分析和功能分析.4)对该病毒皱缩分离物的外壳蛋白进行了原核表达和western-blot分析.以上结果首次从分子水平上确证了在中国引起长豇豆病毒病的主要马铃薯Y病毒属成员为菜豆普通花叶病毒的豇豆株系9BCMV-BLCMV),并测定了该病毒两个分离物的基因组核苷酸全序列,这也是中国该病毒基因组序列的首次报道.全序列的分析表明两个病毒分离物尽管在整个基因组结构中比较相似.但在5’-一UTR和PI蛋白区域同源性很低.变异主要发生在P1蛋白N末端.而这一区域的差异可能正是造成豇豆品种一点红皱缩和黄化两种明显不同症状的原因.SDS-PAGE电泳和western-blot实验表明该病毒的外壳蛋白基因在大肠杆菌TGI中正确表达.从而为该基因的真核表达及功能研究和利用该基因进行抗病育种奠定了基础.
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