本文以挂板法采集温州市洞头海区野生底栖硅藻，分离出16株底栖硅藻，经培养后对藻细胞进行尼罗红染色观察，初步筛选出9株油球较大的藻株，然后进一步开展培养和油脂测定实验，最终筛选出两株生长较快、含油量较高的底栖硅藻——咖啡双眉藻Amphora coffeaeformis和缢缩菱形藻Nitzschia constricta。以该两株底栖硅藻为对象，探讨了尼罗红染色法检测硅藻油脂相对含量的最优条件和氮、磷、硅、植物激素吲哚乙酸IAA和脱落酸ABA、固定化对其繁殖生长和油脂积累的影响。主要研究结果如下：1.富油底栖硅藻的分离纯化和筛选采用挂板法获得野生底栖硅藻，平板分离法和水滴分离法相结合分离纯化得16株底栖硅藻，其中菱形藻属5种、双眉藻属3种、舟形藻属3种、羽纹藻属2种、曲壳藻属2种、拟菱形藻属1种。硅藻细胞经尼罗红染色荧光显微镜观察，初步筛选得9种油体占藻细胞体积较大的藻株，其中菱形藻属3种、双眉藻属3种、舟形藻属2种、羽纹藻属1种。根据9株微藻的比平均生长速率和总脂含量的乘积，最终筛选出2株生长快、含油量高的底栖硅藻——咖啡双眉藻Amphoracoffeaeformis和缢缩菱形藻Nitzschia constricta作为实验藻株。2.硅藻细胞尼罗红染色的条件优化尼罗红（Nile Red）是一种脂溶性的荧光染料，细胞经尼罗红染色后，在荧光显微镜下可观察到金黄色荧光。尼罗红染色荧光检测微藻中油脂的相对含量的方法，其最佳条件因仪器和藻种差异会有所不同，选择合适的染色条件对更准确快捷测定微藻油脂相对含量十分重要。为优化两株藻株的尼罗红荧光光谱法测定油脂含量的最适条件，本试验通过对两种藻株中性脂发射峰、尼罗红浓度、染色时间、细胞密度的探索，得出了本实验对象两株藻株的尼罗红荧光光谱法测定油脂的最适条件为：中性脂发射峰575nm、尼罗红浓度1μg/ml、染色时间6min、细胞密度OD680＜0.5。3.氮、磷、硅对两株底栖硅藻繁殖生长及油脂含量的影响采用光密度法和尼罗红染色法分别测定了氮、磷、硅对底栖硅藻咖啡双眉藻Amphora coffeaeformis和缢缩菱形藻Nitzschia constricta的繁殖速度和油脂积累的影响。结果显示：2种底栖藻在NO3-N浓度为1.746mg/L时，细胞均无明显繁殖生长，且在实验第7天开始死亡，当NO3-N浓度继续升高后，细胞繁殖速度开始加快，当NO3-N浓度达8.820mg/L后，硅藻细胞的繁殖速度不再明显加快。在实验设置的浓度范围内，2种硅藻的繁殖速度均随H2PO4-P浓度升高而加快，但当H2PO4-P浓度达到0.884mg/L后，硅藻细胞的繁殖速度不再明显加快；在实验设置的浓度范围内，2种底栖硅藻均随SiO3-Si浓度增加而加快，但SiO3-Si浓度对2种底栖硅藻细胞繁殖速度影响并不显著。3种元素对2种底栖硅藻繁殖速度的影响力：N＞P＞Si。实验期间，2种底栖硅藻的油脂含量均呈先降后升的变化规律，油脂的积累主要集中在实验后期，氮磷硅限制均能促进2种底栖硅藻细胞油脂的积累，对2株底栖硅藻细胞油脂积累的影响程度，氮限制比磷和硅限制都要大。4.植物激素IAA和ABA对两株底栖硅藻生长及油脂含量的影响为探索植物生长激素对底栖硅藻繁殖生长和油脂积累的影响，作者以咖啡双眉藻和缢缩菱形藻为材料设计了不同浓度IAA和ABA对两种底栖硅藻繁殖生长和油脂积累影响的培养实验。结果表明：低浓度的IAA和ABA能够明显促进两株藻的生长，高浓度则会抑制生长，两株微藻最适宜IAA和ABA浓度有所不同：低浓度的IAA对两株底栖硅藻的生长能起到明显的促进作用，0.5mg/L时效果最为明显；IAA浓度为2mg/L组的细胞密度反而低于对照组的细胞密度；在对数生长期向培养基中添加低浓度（0-1.0mg/L）的ABA能够有效促进两株底栖硅藻的生长，而高浓度（＞1.0mg/L）的ABA则抑制了2株底栖硅藻细胞的繁殖生长。向培养基中添加适量的IAA（浓度为0.5mg/L）能显著促进两株微藻的油脂积累；ABA在低浓度（＜1.0mg/L）能显著促进两株微藻油脂的积累。5.固定化对两株底栖硅藻繁殖生长及油脂含量的影响为探讨固定化培养对底栖硅藻繁殖生长和油脂积累的影响，对筛选出的两种富油底栖硅藻进行了固定化培养试验。结果表明：咖啡双眉藻固定化对繁殖生长影响不大，固定化组与空白对照组硅藻的繁殖生长情况基本上无差异，最终细胞密度无显著差异。与咖啡双眉藻不同，缢缩菱形藻固定化后，初期有一个延缓期，然后加快，且到第19d仍保持较快的生长速度，最终细胞密度显著高于空白对照组（P＜0.01）。缢缩菱形藻固定化效果要好于咖啡双眉藻，固定化使硅藻细胞繁殖增加更快。固定化对硅藻细胞油脂积累有显著影响，固定化组硅藻细胞油脂含量显著高于对照组硅藻细胞油脂含量（P＜0.01）。