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支气管哮喘(asthma)是一种全球性的严重威胁公众健康的常见疾病,并且发病率仍呈上升趋势,但对其发病机理还不完全明确。近年来的研究发现,哮喘是一种以T淋巴细胞、嗜酸性粒细胞和肥大细胞等炎性细胞在气道浸润为特征的慢性气道炎症,其免疫异常表现为CD4~+T细胞的过度活化,Th1/Th2细胞比例和功能的失衡。而树突状细胞(dendritic cells, DCs)是机体内抗原递呈功能最强的抗原递呈细胞(antigen presenting cells, APCs),是目前发现的唯一能在体外激活初始T(na(?)ve T)细胞的APC,其在诱导Th1/Th2型细胞反应平衡和偏移过程中起关键作用。为了从分子水平探讨DC在小鼠哮喘模型中的作用,本研究用卵清蛋白(ovalbumin, OVA)致敏小鼠,建立哮喘模型。然后用重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(recombinant mouse granulocyte-macrophage colony-stimulating factor, rmGM-CSF)和重组白细胞介素4(recombinant mouse interleukin 4, rmIL-4)在体外从骨髓中诱导扩增出DC,观察其形态学变化,用流式细胞仪对其表面分子CD80、CD40、CD86及33D1进行鉴定,并比较这些分子在两组之间表达水平的差异,非同位素的混合淋巴反应测定其刺激同种异体T细胞的增殖能力;采用多探针的核酸酶保护分析(ribonuclease protection assay, RPA)来检测DC中细胞因子mRNA的转录;最后用凝胶电泳迁移率阻滞(electrophoretic mobility shift assay, EMSA)来研究DC中核转录因子κB(nuclear factor κB, NF-κB)的活化情况,为了解DC在哮喘发病机理中的作用提供一定的分子基础,为未来基于DC的哮喘治疗提供新的思路。主要成果及结论如下: 1.哮喘鼠和对照鼠的骨髓细胞在含rmGM-CSF和rmIL-4的完全培养液培养,可从中诱导出大量的DC,第2天出现点状集落、细胞呈圆形,继续培养,集落逐渐增多、细胞变大;第4天在倒置显微镜下可看到大小不一的树突,有少数细胞开始悬浮;至第7天,细胞大多悬浮,呈现DC的典型外形—树突状或星状,