与适应性免疫相比,天然免疫作为一种生物体生来就有的免疫保护机制,在机体免疫中能够被更早更快地激活。硬骨鱼的天然免疫主要通过模式识别受体与外界病原中存在的一些固有的结构或者成分(即病原相关分子模式)的相互作用来激活天然免疫相关的细胞信号通路,从而对侵入机体的病原进行有效地清除和消灭。肽聚糖识别蛋白(PGRP)是一种能够特异地识别、结合肽聚糖,激活先天免疫有关的细胞信号通路,启动下游的效应蛋白或者效应分子进行免疫防御的众多模式识别受体中的一种。人PGRP家族中短型的肽聚糖识别蛋白拥有广谱的直接杀菌作用,而长型的肽聚糖识别蛋白拥有较长转录本,除了具有模式识别受体的作用外还具有保守的酰胺酶活性结构域,拥有与T7噬菌体水解酶相似的2型N-乙酰胞壁酰-L-丙氨酸酰胺酶活性。目前,硬骨鱼中已经有多种肽聚糖识别蛋白被克隆鉴定出来,也对它们的功能和在天然免疫中的作用进行了一定的研究。本研究首先以我国常见的淡水鱼种—鲤鱼为材料,以注射免疫刺激以及浸泡免疫刺激两种免疫刺激方式对其进行处理,处理后不同时间段取不同组织利用实时荧光定量PCR对PGGP基因时空表达模式进行研究。注射免疫刺激后,PGRP5基因mRNA表达在脾脏、头肾、前肠和后肠都有明显上调,在6h达到最高,上调分别达到4.88倍、6倍、3.44倍和5.58倍。PGRP6基因mRNA表达在脾脏、头肾、前肠和后肠有明显上调,在脾脏中1d时达到最高上调达19倍。在前肠中,3h时PGRP6基因mRNA表达上调达到最高,上调17.54倍。在后肠中,6h时达到最高为36.2倍。浸泡刺激后,PGRP5基因mRNA表达在肝脏和后肠中有明显上调。在肝脏中,7d时达到最高为5.87倍。在后肠中,3d时达到最高,为4.27倍。其他组织PGRP5基因变化不明显。PGRP6基因mRNA表达在肝脏、脾脏和后肠中有明显上调。在肝脏中,6h时达到最高,为对照组的14.67倍。在脾脏中,1d时达到最高,上调11.8倍。在后肠中,12h时上调达23倍。以上结果表明PGRP5和PGRP6在细菌免疫中可能发挥重要作用。随后,本研究成功在体表达了PGRP6蛋白,对其酰胺酶活性进行了体外分析。结果表明鲤鱼PGRP6具有与T7噬菌体水解酶相似的N-乙酰胞壁酰-L-丙氨酸酰胺酶活性和与细菌结合及对细菌细胞壁的水解能力。