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目的:探索在酸碱失衡情况下,碱中毒和酸中毒哪一个更容易损害大脑皮层GABA能神经元的功能,为临床上酸碱失衡患者的预防、治疗等方面奠定理论基础。 方法:1.脑切片制备和神经元提取。利用出生18-22天的小鼠,麻醉后断首,然后在充满氧气的人造脑脊液(95%O2and5%CO2)切片机中进行大脑切片,制作人工脑脊液浸润下的小鼠,选择皮层Ⅱ-Ⅲ层的切片并用GFP所标记,制作成的皮层切片约400um。2.制作体外酸中毒和碱中毒的模型。移液管改变细胞内的pH值,使选择的细胞处于碱中毒和酸中毒环境下。将细胞分为3个组别,分别是酸中毒、碱中毒、正常组(对照组),研究细胞的兴奋性突触反应、内在属性(峰间期、阈电位、绝对不应期)、抑制性突触反应。3.全细胞记录技术。用AxoPatch-200B放大器所记录皮质神经元变化,电压钳和电流钳控制其突触活动和内在属性。利用pClamp10进行数据的采集和分析。为研究兴奋性和抑制性突触反应,吸管溶液组成不同,摩尔渗透浓度是295-305,吸管电阻是5~6MΩ。 结果:1.碱中毒比酸中毒使细胞的兴奋性突触后电位的振幅和频率衰减更明显,两组的净变化结果有显著性差异,P<0.01。2.在改变细胞的PH值后,与酸中毒相比,碱中毒使峰间期的频率更低,且两组净变化结果存在显著性差异,P<0.05;碱中毒比酸中毒延长了不应期尖峰,提高了阈电位,两组的净变化结果有显著性差异,P<0.05。3.碱中毒比酸中毒降低了抑制性突触后电位的振幅和频率,两组的净变化结果有显著性差异,P<0.01。 结论:(1)碱中毒比酸中毒更容易破坏GABA能神经元的兴奋性突触传递功能。(2)碱中毒比酸中毒更容易破坏GABA能神经元的内在属性,即神经细胞的动作电位编码能力。(3)碱中毒比酸中毒更容易破坏GABA能突触的反应,即抑制性突触后电位的变化。