论文部分内容阅读
本研究旨在探索填饲是否引起鹅肝脏SCD5、SREBP2和ELOVL6基因甲基化水平的变化，探索填饲日粮中添加不同油脂是否引起鹅肝脏SCD5、SREBP2和ELOVL6基因甲基化水平变化，最后验证DNA甲基化水平与基因表达的调控关系。 本研究运用焦磷酸测序技术检测DNA甲基化水平。填饲组与对照组鹅肝脏组织中SCD5、SREBP2和ELOVL6基因甲基化测定试验结果显示:SCD5、SREBP2和ELOVL6基因各两个片段的甲基化水平均在20％以上，均属于高甲基化状态;与对照组相比，填饲引起三个基因各两个片段的甲基化水平降低，对照组三个基因各两个片段的甲基化水平高于填饲组，SREBP2基因两个片段的甲基化水平低于SCD5、ELO VL6基因。填饲组与对照组的SCD5-1S片段甲基化差异显著(P＜0.05)，SCD5-2S片段甲基化差异不显著（P＞0.05），SREBP2-1S片段甲基化差异显著（P＜0.05），SREBP2-2S片段甲基化差异极显著(P＜0.01)，ELOVL6-1 S片段甲基化差异不显著(P＞0.05)，ELOLV6-2S片段甲基化差异不显著(P＞0.05)，说明填饲对鹅肝脏SCD5、SREBP2基因甲基化存在显著的调控作用。 填饲不同油脂对鹅肝脏组织中SCD5、SREBP2和ELOVL6基因甲基化影响试验结果显示:SCD5、SREBP2和ELOVL6基因的各两个片段的甲基化水平均在20％以上，均属于高甲基化状态;SCD5基因两个片段的甲基化程度平均值大小依次为牛油组＞菜籽油组＞鱼油组， SREBP2基因两个片段的甲基化程度平均值大小依次为鱼油组＞牛油组＞菜籽油组， ELOVL6基因两个片段的甲基化程度平均值大小依次为牛油组＞鱼油组＞菜籽油组，牛油组ELOVL6-1S片段甲基化程度显著大于菜籽油组(P＜0.05)，其他各基因片段的甲基化程度在三个油脂组之间差异均不显著（P＞0.05）。 应用荧光定量PCR技术验证DNA甲基化水平与基因表达的调控关系。结果显示:填饲组SCD5基因和ELOVL6基因的表达量均高于对照组，差异不显著(P＞0.05)，而SREBP2基因在填饲组的表达量显著低于对照组(P＜0.05)。鱼油组的SCD5、SREBP2和ELOVL6基因的表达量均高于牛油组和菜籽油组，菜籽油组的SREBP2基因和ELOVL6基因的表达量均高于牛油组，菜籽油组的SCD5基因的表达量低于牛油组，差异均不显著(P＞0.05/3)。 通过比较甲基化水平与基因表达量的验证，提示填饲引起SCD5、SREBP2和ELOVL6基因甲基化水平降低，SCD5、ELOVL6基因mRNA表达量上升，SREBP2基因的mRNA表达量降低，提示SCD5和ELO VL6的甲基化修饰对mRNA的表达起反向调控的作用。填饲日粮中添加牛油、鱼油、菜籽油均使肝脏中SCD5、SREBP2和ELOVL6基因达到DNA高甲基化状态，SCD5、SREBP2和ELOVL6基因在牛油组中甲基化程度较高，在菜籽油组中的甲基化程度较低。鱼油组中SCD5、SREBP2和ELOVL6基因的表达量最高，菜籽油组其次，牛油组表达量最低，提示朗德鹅对鱼油和菜籽油的吸收能力较高，较不易吸收牛油，综合以上结果，甲基化负向调控基因的表达理论在本研究中基本成立。