【摘 要】
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目的： 本研究拟通过探讨HGF对卵巢癌SKOV-3细胞中PARP-1表达水平的影响，以及HGF/PARP-1通路在调控SKOV-3细胞侵袭转移中的作用，旨在为研究卵巢癌的侵袭转移机制及其针对性治
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目的： 本研究拟通过探讨HGF对卵巢癌SKOV-3细胞中PARP-1表达水平的影响，以及HGF/PARP-1通路在调控SKOV-3细胞侵袭转移中的作用，旨在为研究卵巢癌的侵袭转移机制及其针对性治疗提供新的理论依据。 方法： 1.细胞培养:细胞分组:(1)正常对照组:RPIM-1640培养液（含10％胎牛血清）进行培养;(2) HGF刺激组:加入适量重组人HGF，使培养液中HGF最终浓度分别为10ng/mL，20ng/mL，40ng/mL，60ng/mL，80ng/mL;刺激时间分别为6h，24h，48h。 2.Transwell检测不同浓度HGF对卵巢癌SKOV-3细胞侵袭力的影响。 3.实时荧光定量PCR检测HGF不同浓度及作用时间对卵巢癌SKOV-3细胞PARP-1mRNA的表达。 4.Western-blotting检测HGF不同浓度及作用时间对卵巢癌SKOV-3细胞PARP-1蛋白表达的影响。 5.慢病毒转染卵巢癌SKOV3细胞及获得稳定转染株，外源性40ng/mL HGF处理不同转染组细胞24h，同时设置无HGF处理的对照组。实验分组如下:空白对照组;HGF组;PARP-siRNA组;HGF+PARP-siRNA组;NC-siRNA组;HGF+NC-siRNA组，进行以下实验，以检测在HGF调控下，PARP-1对SKOV-3细胞体外侵袭力的影响。 6.RT-PCR检测稳定转染组细胞中PARP-1 mRNA的表达。 7.Western-blotting检测各组细胞中PARP-1蛋白的表达。 8.Transwell实验检测HGF调控的不同实验组细胞体外侵袭力的影响。 9.ELISA法检测HGF调控的SKOV-3细胞中，PARP-1对细胞分泌MMP-2含量的影响。 结果： 1.HGF可促进SKOV-3细胞的体外侵袭能力。 2.HGF可上调SKOV-3细胞中PARP-1的表达。 3.干扰PARP-1的表达可以部分抑制HGF诱导的PARP-1表达水平。 4.干扰PARP-1的表达可以部分抑制HGF诱导的SKOV-3细胞侵袭能力的增加和MMP-2含量的增加。 结论： HGF诱导卵巢癌细胞发生侵袭转移的作用机制，可能和PARP-1介导MMP-2上调的信号途径有关。
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