目的:RNA干扰(RNA interference, RNAi)多药耐药胃癌细胞7901/VCR多药耐药基因(Multidrug resistance gene, MDR1)转录和蛋白表达,并探讨pshRNA-MDR1对胃癌7901/VCR细胞裸鼠皮下移植瘤内MDR1表达的抑制作用,同时进一步探讨pshRNA-MDR1联合TRAIL基因对胃癌7901/VCR细胞生长的抑制作用,为肿瘤的基因治疗奠定基础。方法:(1)根据MDR1的碱基序列设计并合成两对短发夹RNA,构建重组载体,用阳离子脂质体法体外转染7901/VCR;采用MTT法检测转染胃癌细胞药物敏感性的变化;流式细胞仪检测细胞周期变化;RT-PCR和Western blot检测转染前后细胞MDR1 mRNA转录和蛋白表达的变化。(2)将多药耐药胃癌细胞7901/VCR注射入裸鼠皮下,建立裸鼠皮下移植瘤模型。将pshRNA-MDR1导入移植瘤中,观察肿瘤体积和重量的变化;同时采用免疫组织化学检测肿瘤MDR1表达的变化。(3)将pshRNA-MDR1和凋亡诱导因子TRAIL的质粒共转染入多药耐药胃癌细胞7901/VCR,观察其对肿瘤细胞的抑制作用。结果:(1)成功构建pshRNA-MDR1质粒载体,转染后细胞IC50及耐药指数明显降低,G1期细胞增加,凋亡细胞增加,MDR1mRNA转录水平下降,P-糖蛋白(P-gp)的表达水平降低。(2)pshRNA-MDR1导入裸鼠皮下移植瘤后,与对照组相比,肿瘤体积明显缩小,MDR1表达明显下降。(3)pshRNA-MDR1联合TRAIL基因可明显促进肿瘤细胞的凋亡。结论:在体外实验中,pshRNA-MDR1能有效抑制多药耐药胃癌细胞7901/VCR MDR1基因表达,为进一步开展胃癌的基因治疗奠定了基础;在动物实验中,pshRNA-MDR1明显抑制了裸鼠皮下移植瘤的生长,对移植瘤中MDR1表达有明显抑制作用;pshRNA-MDR1联合TRAIL可增强TRAIL促进肿瘤细胞凋亡的作用,两者具有协同作用。