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前言胃癌是我国常见的恶性肿瘤之一,多以进展期为主,临床死亡率较高。在胃癌的综合治疗中,除根治性手术外,化疗亦占有非常重要的地位。然而胃癌在临床上多存在肿瘤的耐药,因而严重影响了胃癌患者化疗的疗效及其预后。谷胱甘肽转硫酶（GSTs）属Ⅱ相代谢酶,是人体内较为重要的代谢解毒酶系统,且广泛存在于生物体内。它能催化谷胱甘肽（glutathione,GSH）的巯基结合到内源性或外源性亲电子化合物上,使其极性提高,形成易溶于水的化合物排出体外,是与毒物或致癌物质解毒代谢有关的重要酶类。其中由GSTP1基因编码的GST-π是一种重要的GSTs亚型,约占GSTs总含量的90%,并在消化道系统肿瘤中高表达,因而以往在临床上充当肿瘤标志物的角色。目前更多的研究发现GST-π与肿瘤的发生及原发或继发性耐药相关。GSTP1基因单核苷酸多态性可以导致其编码蛋白的酶活性下降,降低对外界致癌物质的代谢排出,从而增加个体对肿瘤易感因素的敏感性,增加肿瘤的发生。本实验旨在基因、蛋白水平探讨GST-π在胃癌细胞对铂类药物敏感性中的作用,以期为胃癌患者指导化疗选药等个体治疗方面提供参考。材料与方法1、实验对象胃癌MGC-803,BGC-823,SGC-7901细胞株生长于含有10%,56℃,30分钟灭活的胎牛血清,12U/ml庆大霉素的RPMI1640培养液中。于37℃,体积为5%的CO2饱和湿度的培养箱内传代培养。2、方法采用多聚酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）分析技术检测三种胃癌细胞的GSTP1基因第五外显子的单核苷酸多态性,采用Western Blot方法检测三种胃癌细胞GST-π蛋白的表达水平及差异,采用MTT法测定铂类化疗药物（顺铂、奥沙利铂）对三种胃癌细胞的增殖抑制影响。3、统计分析方法所有的实验均重复三次,结果以（?）±s表示,采用SPSS11.0软件进行统计学分析,组间比较采用t检验。实验结果1、三种胃癌细胞MGC-803,BGC-823,SGC-7901的GSTP1基因第五外显子都为A/G杂合状态,即105Ile/Val杂合子多态基因型。2、MGC-803细胞不表达GST-π蛋白,BGC-823,SGC-7901细胞都强表达GST-π蛋白,且两者表达量接近一致。3、两种铂类药物都以剂量依赖的方式抑制三种胃癌细胞的增殖。顺铂作用三种胃癌细胞72小时后,得到MGC-803,BGC-823,SGC-7901细胞的IC50值分别为0.71、1.21、1.28μg/ml,奥沙利铂作用72小时后,MGC-803,BGC-823,SGC-7901细胞的IC50值分别为2.42、2.7、3.41μg/ml,且MGC-803细胞的增殖率明显低于BGC-823、SGC-7901细胞的增殖率。MGC-803细胞对这两种铂类药物最敏感。结论1、检测了三种胃癌细胞系的GSTP1基因多态性,三种细胞GSTP1基因都为第五外显子突变杂合子105Ile/Val基因型。2、MGC-803细胞不表达GST-π蛋白,GST-π蛋白表达的差异可能与GSTP1基因多态性无关。3、三种胃癌细胞对铂类药物的敏感性可能与GST-π蛋白表达水平呈负相关,而与GSTP1基因第五外显子多态性无关。4、探讨胃癌多药耐药机制,具有重要的指导意义。