论文部分内容阅读
目的:研究依达拉奉(Edaravone)对小鼠脑出血(ICH)炎症反应的作用并探讨其机制。方法:采用简单随机化法将144只健康C57BL/6雄性小鼠(21–26g)分为假手术组(sham组)及脑出血组(ICH组),脑出血+依达拉奉6 mg/kg·d(LD组)、脑出血+依达拉奉12 mg/kg·d(HD组),每组小鼠大于6只;分别于造模前、造模后24h、72h、7d、14d分别行神经行为学测试,于术后第3天提取各组小鼠脑组织行脑含水量、免疫组化检测、电镜观察及Western blot检测。结果:1.行为学检测:Sham组小鼠术后没有明显神经功能障碍,与Sham组相比,ICH组、LD组及HD组小鼠胶布移除时间及旋转棒掉落时间在术后各时间点均有显著差异(P<0.05);与ICH组相比,LD组及HD组术后3d、7d、14d比较差异均有统计学意义(P<0.05)。2.脑组织含水量:ICH组、LD组、HD组小鼠术后3天血肿周围脑组织含水量明显较Sham组增高(P<0.05);与ICH组相比,LD组及HD组脑组织含水量减少并有统计学意义(P<0.05),HD组减少更为显著。3.HE染色:Sham组脑组织结构完整,神经元形态结构良好,排列整齐,神经细胞未见明显水肿;ICH组、LD组、HD组可见炎性细胞浸润,神经细胞呈空泡样变性,部分细胞核固缩,染色质密度增加。与ICH组比较,LD组、HD组细胞的病理改变减轻,HD组更为显著。4.NeuN~+细胞表达变化:Sham组小鼠术后细胞排列整齐,形态结构良好;ICH组、LD组、HD组阳性细胞表达减少,较多细胞核有固缩,并有空泡样变性;LD组、HD组较ICH组形态结构明显改善,阳性表达区域和数量增多并具有统计学意义(P<0.05)。5.电镜观察白质纤维束:Sham组小鼠白质纤维束完整,无明显脱髓鞘变化;ICH组、LD组、HD组髓鞘明显变薄并发生脱髓鞘改变,G-ratio与Sham组有明显差异(P<0.05),LD组、HD组较ICH组脱髓鞘变化明显减少(P<0.05)。6.CD16/32~+细胞表达变化:Sham组小鼠术后仅有少量表达;ICH组、LD组、HD组阳性细胞表达明显增多,面积增大,细胞呈树杈状;LD组、HD组较ICH组阳性表达减少,具有统计学意义(P<0.05)。7.炎症细胞因子表达:ICH组、LD组、HD组较Sham组的IL-1β及TNF-α表达增加具有差异(P<0.05),与ICH组比较,LD组、HD组表达减少,有统计学意义(P<0.05)。8.免疫荧光结果:与Sham相比,ICH组、LD组、HD组CD16/32~+细胞的数量和CHOP的表达增加,有统计学差异(P<0.05),LD组、HD组较ICH组阳性表达均减少,具有统计学差异(P<0.05)。9.IRE1α/TRAF2通路蛋白表达:ICH组、LD组、HD组较Sham组的BiP、IRE1α、TRAF2和CHOP表达增加具有差异(P<0.05),与ICH组比较,LD组、HD组表达减少,有统计学差异(P<0.05),HD组较LD组降低更为显著。结论:1.在小鼠脑出血后神经细胞发生细胞水肿及细胞调亡,白质纤维束损伤,小胶质细胞激活,促炎因子累积。2.依达拉奉可减轻小鼠脑出血后神经细胞的水肿及调亡,减轻白质纤维束的损伤,同时减少M1型小胶质细胞的激活和促炎因子的累积。3.依达拉奉可能通过ER应激后IRE1α/TRAF2信号通路发挥抑制M1型小胶质细胞活化作用,进而保护神经功能。