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胰腺实性假乳头状瘤(pancreatic solid pseudopapillary neoplasm, SPN)是一种少见的具有恶性潜能的胰腺肿瘤。胰腺SPN发病率低,仅占胰腺肿瘤的1%-2%,多见于年轻女性。肿瘤起病隐匿,大部分患者无临床症状,有症状的患者表现为腹部不适,恶心,呕吐等,位于胰头的SPN偶见黄疸。由于对此肿瘤的认识不断加深和影像学技术的改进,胰腺SPN的检出率在逐渐增加。胰腺SPN临床少见,具有独特的临床表现和生物学行为,然而目前相关基础及临床研究较少。基因突变检测目前已广泛应用于肿瘤的相关研究,对于揭示肿瘤的发生发展过程起到了重要作用。新一代测序技术(next-generation sequencing technology, NGS)以高通量测序为特点,包括全基因组测序和外显子测序。外显子测序是指利用目标序列捕获技术将基因组的全部外显子区域DNA捕获后并通过NGS技术进行测序的方法。其测序过程称为“循环芯片测序法”,是对布满DNA样品的芯片重复进行基于DNA的聚合酶反应(模板变性、引物退火杂交及延伸)以及荧光序列读取。外显子测序针对性强,覆盖度深,数据准确性高,具有简便、经济、高效等优点,已经被广泛应用于肿瘤疾病的研究中。本研究对胰腺SPN新鲜组织样本提取DNA,构建DNA文库并进行高通量外显子测序,初步筛选出突变基因共94个。进一步对突变基因进行生物信息学分析和Sanger测序验证,证实CTNNB1是胰腺SPN的显著突变基因。另对12个胰腺SPN肿瘤组织进行扩大样本PCR验证,结果表明CTNNB1的突变率为93.3%(14／15)。针对CTNNB1编码的β-catenin蛋白共进行了91例石蜡组织切片的免疫组织化学染色,共获得有效染色87例,结果显示共有72例组织切片为阳性,阳性率为82.8%(72／87)。相关性分析表明β-catenin免疫组化阳性表达程度与肿瘤直径有相关性(P=0.029)。此外,本研究回顾性分析2000至2010年之间所有接受手术并具有完整临床病理资料的病例。共入组100例病人,其中84例为女性,16例为男性,中位年龄31(13-68)岁。肿瘤平均直径6.5(1.5-18)cm。共有24例患者诊断为恶性胰腺SPN。49例患者接受了淋巴结清扫,术后病理提示仅有4例患者有淋巴结转移。单因素分析表明,术前CT/MRI显示胰周淋巴结肿大是恶性胰腺SPN的危险因素(P=0.025)。远期随访结果显示,共有两名患者术后出现了肝转移,并接受了肝转移瘤切除术。两名患者分别随访24和32个月,未出现肿瘤复发。综上所述,本论文对胰腺SPN的分子机制和临床病理特征进行了一系列研究,表明CTNNB1基因突变在胰腺SPN发生发展过程中起到重要作用,说明β-catenin表达与胰腺SPN肿瘤增殖密切相关,有希望成为胰腺SPN诊断和治疗的分子靶点。此外,本研究还证明了术前影像学胰周淋巴结肿大与恶性胰腺SPN相关。长期随访结果提示,对恶性胰腺SPN患者应进行密切随访和定期复查。