分子印迹聚合物(molecular imprinted polymer,MIP)具有可设计性、稳定性好、选择性好、易于制备、合成成本低等特点,被认为是天然抗体的有效替代材料。然而,蛋白质分子具有较大的分子尺寸、复杂的构象和结构,当蛋白质用作分子印迹的模板时,容易造成不良的物质传输和永久性的模板截留,蛋白质印迹仍然面临着较多的挑战。在现有的蛋白质分子印迹技术中,表面分子印迹法是克服模板去除困难和提高模板分子结合容量的有效方法。在表面分子印迹中,印迹位点主要分布在表面层或表面层附近,能够降低传质阻力,印迹材料具有快速的结合动力学、较高的选择性和优异的吸附能力。本课题采用表面印迹法制备蛋白质的分子印迹材料,并对其制备条件、印迹性能及应用潜力进行了研究。在本论文的第一部分,我们采用表面分子印迹法在二氧化钛(titanium dioxide,TiO2)纳米颗粒表面制备了溶菌酶(lysozyme,Lyz)的印迹聚合物(Lyz-MIP)。我们系统性地研究了聚合、吸附和洗脱条件对Lyz-MIP的吸附能力的影响。结果表明,在所选条件范围内,随着离子浓度、pH、Lyz、引发剂用量的增加,Lyz-MIP的吸附量也呈增加趋势。随后,我们通过吸附等温线、吸附动力学曲线和选择性吸附实验对最优条件下合成的Lyz-MIP的吸附性能进行了研究,结果表明Lyz-MIP的吸附容量高达152.4 mg/g,明显高于非印迹材料(non-imprinted polymer,NIP);印迹因子为3.74,对Lyz表现出最高的选择性,并且能够从稀释的鸡蛋清溶液中选择性地吸附模板蛋白Lyz。在本论文的第二部分,我们采用表面分子印迹法在壳聚糖微球表面制备了 BMP-2的分子印迹层(Chitosan@BMP-2-MIP)。我们首先通过静电喷雾法制备了壳聚糖微球,然后将肝素修饰到其表面上,在吸附模板蛋白BMP-2之后,通过丙烯酸-2-羟乙酯的聚合在壳聚糖微球的表面上制备了 BMP-2的分子印迹层,最后除去模板分子,得到Chitosan@BMP-2-MIP。Chitosan@BMP-2-MIP 对 BMP-2 的吸附容量为 558.59 ng/mL,明显优于Chitosan@NIP,印迹因子为1.59,具有一定的选择性。Chitosan@BMP-2-MIP具有较好的生物相容性,在实验动物体内无毒副作用,骨缺损模型修复实验的结果显示与对照组和NIP组相比,Chitosan@BMP-2-MIP具有较好的骨缺损修复效果。