【摘 要】
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课题来源:广东省自然科学基金(23003)及广东省科技攻关项目(2KM05101S)。目的和意义:1、寻求一种适合临床需要的,敏感性高、特异性强、高效、经济的检测肝移植受者外周血淋巴细
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课题来源:广东省自然科学基金(23003)及广东省科技攻关项目(2KM05101S)。目的和意义:1、寻求一种适合临床需要的,敏感性高、特异性强、高效、经济的检测肝移植受者外周血淋巴细胞免疫活化基因表达情况的方法;2、通过前面确定的实验方法,研究肝移植术后特定淋巴细胞免疫活化基因的表达对急性排斥反应发生的预测、诊断价值,探索预测、诊断移植肝急性排斥反应发生的敏感基因和方法。研究方法:1、通过对三种实验方法在检测免疫活化基因方面的敏感性、特异性、时效性和经济性进行分析,确定符合临床需求的最佳方法;2、根据前面确定的最佳实验方法,研究肝移植术后免疫活化基因的表达与急性排斥反应发生的关系。研究内容和过程:1、将14例肝移植受者(其中经病理确诊为发生急性排斥反应者7例,未发生排斥者7例)外周血各采取15ml,分为三等份,每份5ml,分别采取逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)定性,Taq man探针荧光PCR法和SYBR Green Ⅰ实时定量PCR法进行检测。将检测结果从敏感性、特异性、时效性和经济性等四个方面进行比较,寻求符合需求的最佳方法;2、利用前面确定的实验方法,检测56例肝移植受者术后淋巴细胞特定免疫活化基因(主要是CD28通路相关的细胞因子有:IL-10,CD40L,Fas,IL-2,IFN-γ,Fasl,TGF-β1,IL-4,穿孔素,颗粒酶,bcl-xl,TNF-
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