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本研究以实验病理学方法对人工感染鹅源1型鸭疫里默氏杆菌(RA)的21日龄的雏鹅进行了系统病理组织学的研究,建立了RA感染雏鹅的病理模型。感染30小时后,急性死鹅1只,其他鹅出现典型的临床症状;感染46到72小后,半数鹅死亡,达到死亡高峰;感染9天后,20%鹅耐过。大体解剖病变为全身各组织器官的浆膜面广泛的纤维素性渗出;肝脏、胸腺肿大;脾脏、法氏囊感染前期肿大,感染后期萎缩;肠道出血,盲肠前期出血,后期畸变;皮下充血出血,并有胶冻样浸润,脑充血。病理组织学变化为纤维素性坏死性心肌炎、肝周炎、脑膜炎;急性肾小管坏死性肾炎、胰腺炎、肠炎;出血性胸腺炎、肺炎、脾炎等;盲肠扁桃体、脾脏、胸腺淋巴滤泡中淋巴细胞减少;除胰腺外,所有检测的组织中都有大量嗜中性白细胞出现。 本研究建立了间接免疫组化(Indirect Immunoperoxidase Staining,IIS)检测RA抗原的方法,该法的最适条件为:以PLP为固定液,以APES为粘片剂,以0.3%的甲醇-H2O2在湿盒中室温下孵育20分钟消除组织中的过氧化物酶及假过氧化物酶活性,兔抗RAIgG与羊抗兔—HRP的稀释比例均为1:25,以4℃过夜作兔抗RAIgG的孵育条件,以10%白蛋白0.05%Tween-20pH7.4的PBS湿盒内室温孵育60分钟处理组织中非特异性染色因素;以TBST为洗涤液,空气振荡器70转/分钟摇洗两次,每次10分钟洗涤切片;以0.5%甲苯胺蓝作为复染液。该方法用于检测感染雏鹅组织器官中的RA抗原具有特异、敏感、直观的优点。 本研究应用建立的间接免疫组化法对RA人工感染21日龄雏鹅后RA抗原在雏鹅各组织器官的分布规律检测结果表明,鹅人工感染RA24小时后,心脏、肝脏、脾脏、肾脏、回肠和直肠RA抗原呈强阳性分布,其次在肺脏、十二指肠、空肠和盲肠RA抗原呈弱阳性分布,胰腺、胸腺、法氏囊和大脑为阴性。在感染46小时后,所有检测器官中都呈阳性,大部分RA抗原阳性组织(肾脏、肺脏、胸腺、十二指肠、回肠、大脑)中都出现嗜甲苯胺蓝物质。在感染58小时后,各个器官RA抗原呈强阳性分布。感染第5天后肝细胞和肺房上皮细胞RA抗原分布呈阳性,感染9天后,肝、肾、胸腺的阳性强度没有下降,其他器官的阳性强度都下降。整个感染过程中,空肠和胰腺RA抗原阳性强度分布较低,大脑RA抗原阳性分布最低。各组织器官中RA抗原阳性分布呈现从间质到实质、从血管及血管周围到组织细胞规律分布的特点。RA感染对鹅的实质器官、肠道、免疫器官都有严重的损伤;RA抗原的分布与RA感染途径及其机体的抵抗力有关;RA对雏鹅机体组织器官的损伤程度与RA抗原的分布阳性强度及其嗜中性白细胞的浸润呈正相关。