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优化了超声辅助提取(USE)虫革头孢菌丝体多糖的工艺条件,分析了所获粗多糖(USEP)与传统热水提取法(HWE)所获粗多糖(HWEP)在化学成分、形貌及热性质等方面的区别,并对USEP主要多糖组分(USEP40-1,USEP70-1)的红外特性、分子量、单糖组分及其体外抗氧化活性进行了研究,主要结论如下:
响应面法优化了USE的工艺条件:超声功率330W,提取时间29min,提取温度62℃优化条件下,粗多糖得率为3.77±0.017%,较热水提取法的得率(3.07±0.014%)高23%,且提取时间缩短了5.5小时。经USE及HWE处理后的原料残渣形貌差异显著,揭示了超声提取过程中菌丝体受到剧烈扰动和固液摩擦作用,使提取效率更高。
USEP及HWEP相应化学组分的含量稍有不同。SEM电镜结果表明HWEP的表面形貌为三维多孔状结构,而USEP的精细结构不清晰,且有大面积聚集现象。差示扫描量热分析结果表明USEP在水分蒸发及多糖热解过程中的相转化温度及相变焓均高于HWEP。以上结果表明:超声处理可能引起粗多糖团聚和结晶区增加。此外,USEP及HWEP的分子量分布及自由基清除能力稍有不同。
建立了D113大孔树脂法同时脱除虫草菌丝体粗多糖中色素和蛋白质的工艺。在优化的静态吸附条件下,脱色率为79.5±1.7%,脱蛋自率为82.2±1.7%,多糖保留率为75.0±1.8%。优化的动态吸附条件下,脱色率为85.1±1.9%,脱蛋自率为85.0±2.0%,多糖保留率为80.2±2.2%。50%乙醇盐酸溶液以12BV/h流速洗脱1 h后,树脂再生性能良好。
USEP经Sephadex G-100分级纯化,获得两种主要多糖组分(USEP40-1,USEP70-1)。经IR检测,USEP40-1和USEP70-1具有多糖特征吸收峰,但二者在1746 cm-1处吸收峰不同。USEP40-1和USEP70-1的分子量分别为61.4 kDa和25.1kDa,二者的单糖组成及摩尔比分别为:甘露糖:葡萄糖;半乳糖:鼠李糖:阿拉伯糖=11.52:5.54:8.75:2.45:2.59和甘露糖:葡萄糖:半乳糖:鼠李糖:阿拉伯糖=11.50:6.74:5.75:4.46:2.39。USEP40-1和USEP70-1的自由基清除能力有一定差异。