禾谷镰刀菌对玉米幼苗生理生化指标和基因组DNA甲基化水平的影响

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众所周知,玉米是重要的粮饲兼用型作物,在国民经济发展中占有重要地位,近年来,产量有很大的提高,但是玉米茎腐病的发生使全世界范围内的玉米产量遭到了严重的破坏,目前在我国有发展加重趋势,主推品种大都感染玉米茎腐病,发病率最高可达70%,成为急需解决的问题。因此,研究玉米对茎腐病原菌的响应机制变得尤为重要。本实验对两个普通玉米自交系Mo17、B73在用不同孢子浓度(0个/mL、103个/mL、105个/mL、107个/mL、109个/mL)的禾谷镰孢菌液处理后,通过MSAP方法测定甲基化程度,分析其甲基化变异模式,并测定经过接种禾谷镰孢菌的幼苗生理生化指标,得到如下研究结果:(1)胁迫后两自交系幼苗叶片中蛋白质含量测定结果显示:玉米自交系Mo17幼苗叶片中蛋白质含量,处理浓度在0-103范围内,叶片中蛋白质逐渐升高,之后,逐渐降低;玉米自交系B73幼苗叶片中可溶性蛋白质含量随着菌液处理浓度(0-109)升高而逐渐降低;各个处理浓度下Mo17幼苗叶片中蛋白质含量要高于B73。(2)自交系叶片内抗氧化酶活力的测定结果:胁迫后各个指标出现了显著变化,SOD活力先显著升高然后降低,POD、CAT活力变化一致,随着胁迫程度升高,活力不断降低,两自交系之间酶活也有明显差异,Mo17酶活要高于B73。(3)自交系叶片内MDA含量的测定结果:各个处理浓度下自交系Mo17、B73幼苗叶片中MDA含量差异显著,随着处理浓度的增加,MDA含量显著增加;B73幼苗叶片中积累MDA量要高于Mo17,说明Mo17能更好地抵御外界菌液胁迫环境。(4)自交系根系中根系脱氢酶活力的测定结果:随着菌液浓度的增加,Mo17与B73根系中脱氢酶活力显著增加,Mo17幼苗根系中脱氢酶活力始终高于B73,但是增加的幅度小于B73,说明在胁迫环境下,Mo17更能保持根系的呼吸强度,增强根系活力。(5)自交系根系中叶绿素含量测定结果:随着菌液处理浓度的增加,两自交系幼苗叶片中叶绿素a含量和叶绿素a/b值变化一致,先显著增加后不断降低,叶绿素b和叶绿素总量变化一致,都显著降低;各个处理浓度下Mo17幼苗叶片中叶绿素a、b含量以及叶绿素总量要高于B73,说明Mo17在逆境下光合能力更强;较高处理浓度下,B73叶绿素a/b值要低于Mo17,说明较高菌液浓度下,B73叶片更易老化。(6)甲基化水平和甲基化模式变异结果:相比对照组而言,使用禾谷镰刀菌液处理后,两自交系在CCGG位点的甲基化水平都升高,随着菌液浓度增加Mo17CCGG位点总体甲基化水平不断增加,B73没有统一的变化规律;甲基化模式变异主要表现在CG和CHG位点发生的去甲基化率和超甲基化率,除了103个/ml浓度下,Mo17CH和CHG位点超甲基化率要明显高于去甲基化率;B73在各个处理浓度下,CG位点超甲基化率与去甲基化率相差不大,CHG位点超甲基化率明显低于去甲基化率,这说明两自交系在受到茎腐病原菌胁迫后,采取的应对机制可能不同。
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