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目的:研究锌指蛋白750(zinc finger protein 750,ZNF750)基因启动子的异常甲基化对其表达的改变及甲基化抑制剂对食管鳞癌细胞生物学行为的影响,并初步探讨其调控机制。方法:运用癌症基因组图谱计划(The Cancer Genome Atlas,TCGA)食管癌数据库分析ZNF750基因表达与其甲基化程度的相关性;通过University of California at Santa Cruz(UCSC)基因组数据库及CpG Island Prediction预测ZNF750基因启动子甲基化位点;亚硫酸氢盐测序PCR(bisulfite sequencing PCR,BSP)方法检测不同食管鳞癌细胞系中ZNF750启动子区的甲基化水平,并采用反转录定量PCR(Reverse transcription quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)法检测不同食管鳞癌细胞系中ZNF750基因的表达;筛选高甲基化的食管鳞癌细胞系KYSE140和KYSE150,甲基化抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-dC)作用后检测ZNF750基因的表达,并通过四甲基偶氮唑盐(Methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法、Transwell法和流式细胞术检测5-Aza-dC处理前后细胞生物学行为的改变;蛋白印迹法(Western blot)检测凋亡相关蛋白聚ADP核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3)和细胞周期蛋白B-1(CyclinB-1,CCNB-1)、细胞周期蛋白E-1(CyclinE-1,CCNE-1)的表达。构建不同甲基化程度的ZNF750启动子荧光素酶报告质粒pGL3-Basic-P600、pGL3-Basic-P600-HpaII、pGL3-Basic-P600-HhaI,转染食管鳞癌细胞系KYSE150,双荧光素酶实验检测ZNF750启动子DNA甲基化对其转录活性影响。结果:1、生物信息学预测ZNF750基因启动子区(-456至-110)存在CpG岛甲基化位点并且ZNF750基因的表达与其甲基化程度相关;2、食管鳞癌细胞中ZNF750基因启动子的甲基化程度与其表达呈负相关;3、甲基化抑制剂5-Aza-dC诱导食管鳞癌细胞KYSE140和KYSE150中ZNF750基因的表达并对食管鳞癌细胞的增殖、侵袭和迁移起抑制作用,促进细胞凋亡,将细胞周期阻滞在G2/M期。4、甲基化抑制剂5-Aza-dC处理后,食管鳞癌细胞系KYSE140和KYSE150中凋亡相关蛋白PARP、Caspase-3剪切作用增强,周期相关蛋白CCNB-1表达升高,CCNE-1表达降低。5、DNA甲基化抑制ZNF750基因启动子的转录活性。结论:ZNF750基因启动子甲基化与其表达量呈负相关,用甲基化抑制剂5-Aza-dC处理高甲基化的食管鳞癌细胞系KYSE140和KYSE150后,ZNF750基因表达恢复,细胞的增殖、侵袭和迁移能力受到抑制,细胞周期阻滞在G2/M期,促进了细胞凋亡,并进一步通过双荧光素酶实验验证了ZNF750基因启动子的甲基化对其转录活性的抑制作用。