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薏苡素(Coixol)是从薏苡、白茅、野甘草等植物中提取而来的无色针状结晶,也是薏苡种仁油抗癌制剂“康莱特注射液”中的主要活性成分之一。目前有很多关于康莱特注射液抗癌同时减轻癌症痛感的临床报道,也有文献报道薏苡素具有镇痛抗炎、抗菌、降糖等作用,研发薏苡素制剂可以满足临床用药的需求,具有实际应用价值。由于薏苡素的水溶性差,本实验采用羟丙基-β-环糊精(HP-β3-CD)包合薏苡素,同时考察薏苡素-HP-β-CD包合物的体外释药情况和稳定性等。此外,建立生物样品中薏苡素的HPLC测定方法,考察薏苡素及其包合物灌胃给药后在大鼠体内的药动学特征和组织分布情况,为薏苡素新制剂的应用提供基础实验依据。主要研究内容和结果如下:1、薏苡素-HP-β-CD包合物的制备及表征采用溶剂搅拌-冷冻干燥法制备薏苡素-HP-β-CD包合物,通过扫描电镜法、红外光谱法、差示扫描量热分析和X-射线衍射法对包合物进行表征,验证其包合成功。采用HPLC法测定包合物中薏苡素含量,并进行方法学考察。实验结果表明:薏苡素浓度(x)与峰面积(y)具有良好的线性关系,薏苡素含量测定回归方程为:y=108096x-48927(R2=0.9995)。方法的专属性、精密度、稳定性和加样回收率良好,适用于包合物中薏苡素的含量测定。2、优化薏苡素-HP-β-CD包合物的制备工艺在单因素影响实验的基础上,以包合率和包合物得率的综合评分为考察指标,筛选出HP-β-CD与薏苡素投料比、包合时间、包合温度三种因素进行星点设计-响应面实验,确定制备包合物的最佳工艺:HP-β-CD:薏苡素投料比为3:1,包合温度60℃,包合时间5h。3、薏苡素-HP-β-CD包合物体外释放实验及稳定性考察采用透析袋(截留分子量为8000～14000)法进行体外释药考察,实验结果表明,薏苡素-HP-β-CD包合物累计释药率比薏苡素单体的溶出提高了 2.55倍,说明薏苡素-HP-β-CD包合物溶解度远大于薏苡素。稳定性实验结果显示:薏苡素-HP-β-CD包合物在高温和光照条件下稳定性良好:在高湿环境中易吸湿潮解,因此在生产、贮存和运输过程中尽量保持避光密封干燥。4、薏苡素-HP-β-CD包合物药动学及组织分布研究采用HPLC法测定生物样品中薏苡素的含量,为更有效地避免生物组织中繁杂成分干扰,采用内标法进行定量分析并进行方法学考察。实验显示,薏苡素与内标物峰形良好,完全分离,有良好的专属性。血浆样品中,薏苡素在考察的0.16～25.00 μg/mL浓度范围内线性关系良好;各组织样品中,薏苡素在考察的0.03～3.13 μg/mL浓度范围内线性关系良好,精密度、样品稳定性及回收率RSD均良好,可用于生物体内样品的检测。采用血药浓度测定法研究薏苡素及其包合物在大鼠体内的药动学特征。以100 mg/kg的剂量进行大鼠灌胃给药后,采用二室模型对数据进行处理求得药动学参数,确定:薏苡素的平均血药峰浓度Cmax=14.9±2.82 μg/mL比薏苡素包合物的Cmax=17.48±2.33 μg/mL为低;薏苡素及其包合物的消除半衰期t1/2Z分别为0.83±0.44h和1.97±0.63h,平均滞留时间MRT0～10)分别为1.00±0.13 h和237±0.23 h。与薏苡素相比,薏苡素包合物的消除半衰期t1/2Z显著延长(p<0.01),平均滞留时间MRT(0～10)显著延长(p<0.01)。此外,薏苡素包合物在大鼠体内的药时曲线下面积AUC(0～10)显著提高(p<0.01),是薏苡素的232.83%。说明薏苡素经HP-β-CD包合后能增加其在体内的吸收,延缓薏苡素在体内的代谢消除,达到长效作用,提高其口服生物利用度。按给药量100 mg/kg计,大鼠灌胃给予薏苡素及其包合物后,HPLC测定0.25 h、0.5 h、1h、3 h、6 h、10 h大鼠各组织中薏苡素浓度,比较药物在各组织中的分布情况。结果表明,在0.25 h时,包合物组在各组织中的浓度均低于薏苡素组;在0.5 h时,包合物组在各组织中的浓度升高较快;在1h及以后,包合物在各组织的浓度均高于薏苡素组;在6h时,薏苡素组的心、脾、肺、脑中药物浓度已低于检测限;而包合物组的各组织中药物浓度均能检测到。此外,薏苡素组在0.25 h时各组织中药物浓度达到最大值;而包合物组在0.5 h时各组织(除肾)中薏苡素浓度达到最大值。通过对比可以说明HP-β-CD的包合可提高薏苡素在组织脏器中的浓度,同时使薏苡素缓慢释放而具有长效作用;包合物组在各组织中的含量下降速度比薏苡素组的缓慢,说明制成包合物后可延缓薏苡素在体内的消除过程。总的趋势来看,在肾、肝中薏苡素含量明显大于其他脏器;各组织器官中,薏苡素的浓度大小依次为:肾>肝>脾>心>肺>脑。与薏苡素相比,包合物在肾中的含量下降速度缓慢,说明包合物可延缓药物在体内的消除过程。值得注意的是,脑部也能检测到薏苡素的含量,说明薏苡素能透过血脑屏障,提示薏苡素可能作用于脑部的中枢神经而发挥镇痛作用;随着时间的延长,薏苡素包合物在脑部含量下降速度缓慢,说明包合物可减缓药物在脑部的消除速度,增加在脑部的滞留时间,提示“康莱特注射液”对癌患的镇痛作用很有可能是所含成分薏苡素所为。