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目的:探讨不同浓度的渗透压溶液对人胚皮肤成纤维细胞(Human embryonic skin fibroblast,HESF)、人永生化表皮细胞(Human immortalized epidermal cells,HIEC)、人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)和表皮干细胞(Epidermal stem cells,ESC)增殖的影响。方法:利用中性蛋白酶-胰酶消化法及Ⅳ型胶原粘附法原代提取及培养ESC,免疫荧光进行鉴定。配制五种不同渗透压梯度DMEM培养基,冰点渗透压仪测其渗透压为:G1(低渗组:230mmol/L),G2(低渗组,262mmol/L),G3(对照组:293mmol/L),G4(高渗组:321mmol/L),G5(高渗组:354mmol/L)。HESF,HIEC,HUVEC分别在五组不同培养基中孵育1h、3h、6h、12h、24h、48h、及72h,倒置显微镜下观察其细胞形态,CCK-8试剂盒检测其不同时间点的细胞增殖率。结果:HESF在低渗和高渗培养条件下,细胞增殖率降低(P<0.05)。HIEC在G1培养6、24、48h时,细胞增殖率降低(P<0.05),12h时升高(P<0.05);在G2中,1h、72h时细胞增殖率升高(P<0.05),48h时降低(P<0.05);在G4,G5培养条件下,细胞增殖率降低(P<0.05)。HUVEC在低渗G1培养1、3、12和24h时,细胞增殖率降低(P<0.05),在72h时细胞增殖率升高(P<0.05);在G2、G4、G5条件下,细胞增殖率降低(P<0.05)。ESC在G1培养6、24、48h时,细胞增殖率降低(P<0.05);在G2中,48h、72h时,细胞增殖率降低(P<0.05);在G4中,1h时细胞增殖率增高(P<0.05),12h、24h、48h、72h时细胞增殖率降低(P<0.05);在G5中,1h、3h、6h时细胞增殖率增高(P<0.05),12h、48h、72h时细胞增殖率降低(P<0.05)。结论:培养基渗透压梯度显著影响HESF、HIEC、HUVEC、ESC的增殖能力,且不同作用时间对HIEC,HUVEC的增殖能力的影响存在差异。通过本实验证实了渗透压对细胞增殖活力的影响,为临床调整创面渗透压促进伤口愈合以及组织工程技术利用渗透压培养表皮干细胞提供了理论依据。