【摘 要】
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Jhdm1d是位于小鼠6号染色体上的编码包含有JmjC结构域的组蛋白去甲基化酶的基因,该结构域包含的氨基酸有940个,2008年,由NCBI将其名称确定为Jhdm1d。Jhdm1d能使H3K9me2和H3K2
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Jhdm1d是位于小鼠6号染色体上的编码包含有JmjC结构域的组蛋白去甲基化酶的基因,该结构域包含的氨基酸有940个,2008年,由NCBI将其名称确定为Jhdm1d。Jhdm1d能使H3K9me2和H3K27me2产生特异性的去甲基化,在转录抑制和染色质调节过程中均有所参与,并且另有研究证实,该基因也能参与许多发育过程,包括减数分裂以及重要器官形成等等,但Jhdm1d在肝癌中的作用目前尚无报道。为了深入研究Jhdm1d对小鼠肝癌细胞生物学特性的影响,通过构建干扰Jhdm1d基因表达的慢病毒载体,即p LKO.1-Jhdm1d,将p LKO.1-Jhdm1d与包装质粒pCMV-Δ8.9和pCMV-VSV-G共三种质粒共转染HEK-293T细胞,包装相应的慢病毒,并进行病毒滴度的测定。利用已包装的病毒感染肝癌细胞Hepa1-6细胞,并且利用实时定量RT-PCR和Western Blot检测分析,结果表明Jhdm1d的表达下调。进一步采用MTT增殖实验和结晶紫染色的方法发现pLV-Jhdm1d感染Hepa1-6细胞后促进其的增殖和克隆形成。为了进一步探究Jhdm1d的作用机制,通过PI染色分析发现,Jhdm1d对肝癌细胞Hepa1-6的细胞周期DNA合成期有显著性影响。另外,细胞划痕以及Transwell实验的结果也表明Jhdm1d下调能够提高肝癌细胞Hepa1-6的迁移和侵袭的能力。为进一步研究Jhdm1d对小鼠体内成瘤的影响,将感染pLV-Jhdm1d的Hepa1-6细胞进行了裸鼠体内移植实验,收集细胞进行皮下注射,结果显示,与对照组相比,pLV-Jhdm1d感染下调Jhdm1d表达后显著促进了肿瘤的增长。综上所述,Jhdm1d下调表达对小鼠肝癌细胞的增殖迁移以及侵袭等生物学特性有促进作用,由此推断Jhdm1d在小鼠肝癌细胞Hepa1-6中具有肿瘤抑制的功能。
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