【摘 要】
:
哺乳动物体内能够自身合成饱和脂肪酸和单不饱和脂肪酸,但由于缺乏在第九位碳原子以上位置引入不饱和双键的去饱和酶(脱氢酶)。所以不能自身合成必需脂肪酸,需要从植物及海产品中摄取。本试验试图构建一个肌肉组织特性的ω-6脂肪酸去饱和酶(脱氢酶)真核表达载体,通过原核显微注射法把棉花的ω-6脂肪酸去饱和酶导入到小鼠体内,以小鼠为动物模型,建立动物体内的必需脂肪酸合成代谢通路。同时构建一个ω-6脂肪酸去饱和酶
论文部分内容阅读
哺乳动物体内能够自身合成饱和脂肪酸和单不饱和脂肪酸,但由于缺乏在第九位碳原子以上位置引入不饱和双键的去饱和酶(脱氢酶)。所以不能自身合成必需脂肪酸,需要从植物及海产品中摄取。本试验试图构建一个肌肉组织特性的ω-6脂肪酸去饱和酶(脱氢酶)真核表达载体,通过原核显微注射法把棉花的ω-6脂肪酸去饱和酶导入到小鼠体内,以小鼠为动物模型,建立动物体内的必需脂肪酸合成代谢通路。同时构建一个ω-6脂肪酸去饱和酶的原核表达载体,通过原核表达来生产ω-6脂肪酸去饱和酶。使用得到的蛋白来生产抗体用于下一步表达检测的Western印迹试验。 本实验以pEGFP-N1质粒为骨架载体,用酶切连接的方法构建一个顺序含有α-actin启动子、FAD2 cDNA、SV40 polyA加尾信号的真核表达载体,双切线性化后回收,使用回收的表达载体经原核显微注射生产转基因小鼠。采用聚合酶链式反应(PCR)和Southern印迹对阳性鼠进行检测。以PCR及酶切连接的方法构建一个含有FAD2 cDNA编码序列的原核表达载体,此蛋白的N端融合有S-tag标签,便于对表达的蛋白进行Southern印迹检测及纯化。 经受精卵原核显微注射后移植到受体母鼠,第一批移植受体后产仔34只,经PCR检测阳性为3只。 原核表达载体pETFAD2转化到表达菌株BL21(DE3)后,经IPTG诱导得到了目标蛋白。
其他文献
采用顶空-气相色谱测试了低氘酒中乙醛、乙酸乙酯、甲醇、仲丁醇、丙醇、异丁醇、正丁醇、异戊醇、己酸乙酯、乳酸乙酯含量。结果表明,各成分在各自浓度范围内线性良好,标准曲线的相关系数均大于0.999,标准偏差小于5%,检出限均可达1.0×10-4%左右,加标回收率在95.12%~104.87%之间。建立了标准加入法测试氘含量,其回归方程的相关系数接近1,并测试了低氘酒中氘浓度,含量为80×10-4%左右
2017年12月8日上午,王璋先生学术报告会暨图书捐赠仪式在郑州大学图书馆举行,笔者非常荣幸地参加了图书馆捐赠仪式,目睹了王璋先生向学校捐赠《周易大用》《大众周易》《亲情热线365》三种图书各50本。赠书之举,大爱无言。接着,笔者又认真聆听了王璋先生作的《大胆推开门迈开步,从中华文化中汲取力量》的学术报告,分享了他学习《周易》的心得体会。他认为学习《周易》的过程不仅是在感受传统文化的魅力,更
目的:针对急诊手术治疗重症胸部创伤并创伤性休克临床效果给出了详细的探究和分析。方法:挑选我院2018年1月-2019年1月救治的60例患者,将其分为两组,一组为实验组、另外一组为对照组。对照组应用择期手术的形式治疗;实验组应用急诊手术的形式治疗。之后,对患者满足度、临床治疗效果、并发症等症状实施统计和分析。结果:实验组患者平均住院时间小于对照组,治疗满意程度高于对照组,发生并发症的概率也小于对照组
本实验通过对“双重套式PCR对不同取样胚胎性别鉴定灵敏度测试”及“OPS法冷冻胚胎双重套式PCR性别鉴定”的研究,进一步完善了哺乳动物胚胎性别鉴定技术体系,尤其是冷冻胚胎的性别鉴定技术。为哺乳动物胚胎、尤其是冷冻胚胎的性别鉴定在生产实践中获得更高的效率提供了有价值的实验参数。 在测定双重套式PCR微量扩增体系的灵敏度实验中,从Gene Bank中检索出不同品种小鼠的SRY、ZFX基因各自共有
人工智能家用电器在人们的日常生活中应用的越来越广泛。随着生产力的发展,消费者不再单纯满足于产品的功能,还希望产品能满足自己的情感需求,而仿生设计能唤起人们的自然情感。因此在智能家电设计中应注入更多具有创新力的仿生因素,使智能家电更具差异化。本文从产品的个性特点着手,深入分析智能家电仿生设计的情感化表现,从而探究产品情感化的设计方法,从而推动我国智能家电的发展,使之走向更美好的未来。
传统抗生素通常以细菌生存的关键因素为作用靶标,导致细菌抗药性的产生越来越普遍和严重。因此,靶向细菌毒性因子、而不影响细菌的生长,成为抗菌药物研发的新思路和新途径。细菌Ⅲ型分泌系统(T3SS)是革兰氏阴性病原细菌中的关键毒性因子,已经成为了研发新型药物的理想靶标之一。前期工作中我们鉴定了TS006(邻香豆酸)、TS010、TS015和TS018共4种对水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryz
甲胺磷等有机磷农药被大量用于农业生产来防治病虫害,但其残留造成了环境与食品的严重污染,引起了社会的广泛关注。如何有效地消除土壤、蔬菜、瓜果等中的农药残留,已成为人类亟待解决的问题。 采用室内培养实验方法,从石家庄农药化工厂土样中分离到一株能以甲胺磷为唯一碳源、氮源和能源生长的芽孢杆菌(Bacillus)B-4。对菌株的个体形态、生理生化特点进行了分类研究,初步鉴定为地衣芽孢杆菌(Bacill
本文是关于中国缟蝇科(双翅目:缟蝇总科)系统分类研究的硕士学位论文。 文中概述了缟蝇科的生物学及研究意义、研究历史及现状,并描述了缟蝇科的基本特征及分类常用特征。 作者整理研究了中国农业大学昆虫标本馆及中国科学院动物研究所收藏的缟蝇科标本,共描述缟蝇科同脉缟蝇属4亚属26种,其中包括22新种:环毛多鬃同脉缟蝇Homoneura(Chaetohomoneura)setulosa sp.n
开发利用太阳能解决日益严重的环境危机迫在眉睫,为了提高对太阳光的利用率和光催化剂的性能,采用原位生长并结合表面静电吸附的方法制备三元复合材料,先利用水热合成Mo S2/RGO二元异质结复合材料,再根据材料等电点调变溶液pH值制造Mo S2与Fe2O3表面电荷同性、而与RGO表面电荷异性,进而构筑Mo S2/RGO/Fe2O3全固态Z-Scheme光催化剂。通过扫描电镜和透射电镜观察发现,Mo S2