柑橘木虱对九里香叶及番石榴果实挥发油的趋性研究

来源 :华南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong464
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柑橘木虱是柑橘类新梢期主要害虫,在我国柑桔上为害的主要木虱种类为亚洲柑桔木虱(Diaphorina citri Kuwayama),属同翅目,木虱科,寄主植物为芸香科柑桔、黄皮、九里香等果树和观赏植物,其造成的直接为害不大,但是,这种木虱是世界柑桔产业最具毁灭性的传染病害—柑桔黄龙病亚洲种"Candidatus Liberibatter asiaticus"和美洲种"Candidatus Liberibacter americanus"唯一已知的传播媒介,因此成为柑桔上最危险的害虫,引起了全世界的重视。柑橘黄龙病作为一种系统性的毁灭性病害,尚未找到好的防治药剂和给药途径,俗称柑桔上的“癌症”。因此,柑橘木虱的有效治理,对控制柑桔黄龙病的传播与蔓延尤为重要。为了找出对柑橘木虱产生趋性作用的有效活性成分,进一步研发引诱剂和驱避剂,本文研究了柑橘木虱成虫对九里香叶以及番石榴果实的嗅觉反应,番石榴果实精油对柑橘木虱成虫的生物活性,以及其触角电位实验,主要结果如下:   1、通过Y形嗅觉仪研究柑橘木虱成虫对其寄主九里香叶、非寄主番石榴果实及其各自挥发油的嗅觉行为反应。结果表明:柑橘木虱对新鲜九里香叶表现出很显著的正趋性,随着叶片量的增加,分别有70%,75%,82.5%的柑橘木虱趋向九里香气味的Y形臂。同样对九里香叶精油也表现了极显著的趋性,浓度为10-3μL/μL、10-2μL/μL、10-1μL/μL、1μL/μL和10μL/μL,分别有67.5%,70%,72.5%,72.5%,77.5%的柑橘木虱选择了九里香气味的Y形臂。而柑桔木虱对番石榴果实则表现出负趋性,结果表明:30g番石榴果实对柑橘木虱没有表现出显著的驱避作用,但是在40g、45g时,驱避作用极为显著。同样地,番石榴果实挥发油对柑桔木虱也表现了很强的驱避作用,在10-3μL/μL、10-22μL/μL、10-1μL/μL、1μL/μL和10μL/μL五个浓度下,分别有67.5%,67.5%,70%,72.5%,77.5%的柑橘木虱选择了空白对照的Y形臂。   2,在室温30℃左右条件下,测试了番石榴果实精油对柑橘木虱成虫的熏蒸作用,结果表明,在试验浓度为3.2μg/mL涤件下处理12 h,24 h和36 h的校正死亡率都达到了60%以上,在试验浓度为6.4μg/mL条件下处理12 h,24 h和36 h的校正死亡率都达到了80%以上;药剂喷洒法测试番石榴果实精油对柑橘木虱产卵的影响,发现与清水对照组相比,番石榴精油处理组柑橘木虱的产卵量与处理组的产卵量有显著的差异减少;测试柑橘木虱成虫对挥发油的定向反应,结果表明:处理组与对照组相比,柑橘木虱对挥发油的选择率差异性显著,说明番石榴果实精油中存在对柑橘木虱有生物活性的物质,驱避和熏蒸效果显著。   3、通过气象色谱-质谱联用技术,对九里香精油进行分析,共检测出40个成分,鉴定了29个成分;对番石榴果实精油进行分析,共检测出42个成分,鉴定了29个成分。利用顶空固相微萃取技术对新鲜九里香叶挥发物进行萃取分析,结果表明:挥发性化学物质鉴定出18种化合物,这些化合物主要由萜类化合物组成。对新鲜番石榴果实精油的分析,鉴定出12种化合物,主要由烯类组成。   4、利用Y型嗅觉仪测定柑橘木虱成虫对九里香挥发性化合物标准品的趋性,结果表明:把表蓝桉醇按体积比配成1~0.0001μL/μL浓度系列,柑橘木虱对其正趋性显著,处理与对照相比差异达到显著水平,其中在浓度为10-2μL/μL时达到了极显著水平,说明,标样表蓝桉醇对柑橘木虱有很强的吸引作用。对九里香挥发性化合物标样的混配实验结果中,柑橘木虱对10-1叶绿醇+表蓝按醇、10-1叶绿醇+2-甲氧基-4-乙烯苯酚、10-22-甲氧基-4-乙烯苯酚+10-1(E)-β-金合欢烯,10-4表蓝按醇+顺-3-己烯醇乙酸酯(比例均为1:1)表现出正趋性,与空白对照相比差异达到显著水平,其中10-22-甲氧基-4-乙烯苯酚+表蓝按醇(1:1)时,与空白对照相比差异达到极显著水平,说明以上组分的配比对柑橘木虱有吸引作用。柑橘木虱对番石榴果实挥发性化合物标准品10-3桉油精+顺-3-己烯醇乙酸酯(1:1)则表现出负趋性,选择空白对照的木虱数量显著多于处理。   5、利用触角电位技术,测试了柑橘木虱雌虫对不同浓度的九里香精油,番石榴果实精油以及标样表蓝桉醇的触角电位值。结果表明:柑橘木虱雌虫对浓度为0.01μg/mL、0.1μg/nL不同浓度的番石榴果实精油以及0.001μg/mL的、九里香精油以及表蓝桉醇均有不同程度的EAG反应值比较小,但是对九里香精油的反应值都比较大,五个浓度都与对照差异显著。这一结果与前面柑橘木虱的趋性反应一致。再一次证实了九里香叶对柑橘木虱的吸引作用,番石榴果实对柑橘木虱的驱避作用,并且,明确了表蓝桉醇是九里香叶中吸引柑橘木虱的活性化合物之一。
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