【摘 要】
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目的：观察Toll样受体4在乙肝病毒相关肝癌细胞系中的表达及对其生物学活性的影响。方法：1、Western blot检测Hep3B、HepG2.2.15、HepG2、SMMC7721及Huh7五种肝癌细胞中TLR4蛋白
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目的：观察Toll样受体4在乙肝病毒相关肝癌细胞系中的表达及对其生物学活性的影响。方法：1、Western blot检测Hep3B、HepG2.2.15、HepG2、SMMC7721及Huh7五种肝癌细胞中TLR4蛋白表达情况，选择TLR4表达高的HBV阳性肝癌细胞作为研究对象。2、构建4个miR-TLR4质粒和一个阴性对照质粒，选择干扰效果明显的质粒转染TLR4表达高的HBV阳性肝癌细胞。实验分为正常对照组，阴性对照组，干扰质粒3组及干扰质粒4组。通过MTT比色法、克隆平板形成实验、流式细胞术分别检测干扰TLR4表达对肝癌细胞增殖、克隆形成、周期及凋亡的影响。结果：1、TLR4基因在五种肝癌细胞株中均有表达，在Hep3B细胞中表达最高，其次是SMMC7721、HepG2.2.15和HepG2细胞，而在Huh7细胞中表达最低。2、与正常组和阴性对照组相比，干扰TLR4表达后，Hep3B细胞的增殖能力明显受到抑制（P＜0.05），克隆形成率显著下降（P＜0.05），S、G2期细胞比列明显增加（P＜0.05）、G1期细胞比例减少（P＜0.05），并可促进细胞凋亡（P＜0.05）。结论：1、乙肝病毒相关肝癌细胞中TLR4表达上调。2、在体外干扰TLR4表达后，hep3B细胞系增殖及周期受影响，具体表现为：MTT示生长、增殖受限，克隆率下降，凋亡增加，周期阻滞于G2/M期。
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