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柑橘种属作为我国的大宗水果,在工业生产中多用于果汁、罐头的加工,产生的柑橘副产物除20%用于生产陈皮外,大部分作为废弃物被填埋处理,然而柑橘种属果皮中具有多种生物活性物质,如精油、黄酮、类胡萝卜素、柠檬苦素等。引起人们普遍关注的多甲氧基黄酮是柑橘种属果皮中所特有黄酮类物质,已有研究表明多甲氧基黄酮具有抗炎、抗癌、抗动脉粥样硬化、抗氧化等生物活性,所以高效提取分离、合成多甲氧基黄酮对食品、药品、保健品行业具有重要意义。本课题主要对清见蜜柑中的多甲氧基黄酮进行提取,比较了不同柑橘果皮、不同提取极性部位的多甲氧基黄酮含量,并对果皮中羟基化多甲氧基黄酮的转化率进行分析;采用柱层析和HPLC制备柑橘果皮中的多甲氧基黄酮;合成出2种5-羟基多甲氧基黄酮,并测定了川陈皮素、5-羟基川陈皮素、橘皮素、5-羟基橘皮素抗氧化活性。主要研究结果如下:(1)提取清见蜜柑果皮中多甲氧基黄酮,选取乙酸乙酯作为提取溶剂,超声30min,料液比1:30,提取两次作为超声提取的最优条件;乙酸乙酯90℃C回流4h,料液比1:30,提取两次作为回流提取的最优提取条件,且回流提取率高于超声提取。柑橘种属果皮中羟基化多甲氧基黄酮主要发生在黄酮母核A环5位上。柑皮中羟基化多甲氧基黄酮主要为5-羟基川陈皮素(141.39±1.84μg/g)、5-羟基橘皮素(19.67±41.24μg/g)、5-羟基-3,6,7,8,3′,4′-六甲氧基黄酮(4.95±1.08μg/g),其羟基化转化率分别达到15.28%、3.87%和17.15%,转化水平均高于橘皮和橙皮。而在橘皮中未检测出5-羟基甜橙黄酮,在橙皮中未检测到5-羟基橘皮素。(2)对清见蜜柑乙酸乙酯提取物采用二氯甲烷-甲醇(100:1、90:1、80:1、70:1、60:1、50:1、40:1、30:1、20:1和10:1)和正己烷-乙酸乙酯(10:1、9:1、8:1、7:1、6:1、5:1、4:1、3:1、2:1、1:1和纯甲醇)两种不同的洗脱体系进行柱层析分离,表明正己烷-乙酸乙酯体系的1:1比例及纯甲醇组分中的多甲氧基黄酮富集和分离效果最高,采用半制备型HPLC,可对其中主要的多甲氧基黄酮进行直接制备,获得高纯度的单体化合物。(3)川陈皮素和橘皮素分别在3M HC1,甲醇为媒介下,于90℃回流72h,反应得到5-羟基川陈皮素和5-羟基橘皮素。比较了这四种多甲氧基黄酮的抗氧化活性,在ABTS和DPPH自由基清除能力中,5-羟基化的多甲氧基黄酮的自由基清除能力略大于或等于未羟基化的多甲氧基黄酮,5-羟基多甲氧基黄酮含有羟基基团但抗氧化活性未有预想的高,这可能与5位羟基与4位的酮基之间形成分子内氢键有关。