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厚朴(Magnolia officinalis Rehd. et Wils)是一种资源丰富且广泛分布于我国南北十多个省区的传统中药材。其中厚朴酚与和厚朴酚为厚朴药材中的主要活性成分。本实验研究考察通过 HPLC法测定超声辅助提取天然厚朴叶中酚类的含量。运用响应面优化HPLC法测定超声辅助提取厚朴叶中有效成分的工艺条件,探讨了料液比、提取次数、超声时间以及乙醇浓度对厚朴叶中两种酚类的含量的影响,并对不同提取方法提取厚朴叶中有效成分进行了其体外抗氧化活性测定。 ⑴通过 HPLC法对厚朴叶中厚朴酚与和厚朴酚的含量进行测定,得到超声辅助提取法中厚朴酚含量为0.027%、和厚朴酚含量为0.014%;药典提取方法中厚朴酚含量为0.015%、和厚朴酚含量为0.014%。 ⑵为了优化 HPLC测定厚朴叶中厚朴酚与和厚朴酚的工艺条件,在单因素的基础上,利用 Design Expert.V8.0.6.1软件,设计了4因素、三水平的 Box-Behnken中心组合试验,进行响应面法分析,研究了料液比、提取次数、超声时间、乙醇浓度对提取工艺的影响。结果表明,厚朴叶中和厚朴酚含量提取的最佳工艺是:料液比为1:20、提取次数为一次、超声时间为90min、乙醇浓度为70%。 在最佳提取条件下,进行3次重复试验,得到厚朴叶中和厚朴酚含量为40.38μg/mL、厚朴酚含量为81.05μg/mL,与理论预测值比较接近,证实此法对厚朴叶中酚类提取效率较高,该提取工艺完全可行。此工艺条件可在实际生产中代替传统的有机溶剂萃取法。 ⑶本实验采用4种不同的抗氧化测定方法来综合评定厚朴叶不同提取方法的抗氧化能力。在实验所取的浓度范围内,对超声辅助提取、药典方法提取的厚朴叶提取物均具有较强的清除 DPPH?、O2-?、?OH的能力,并且也具有一定的三价铁离子还原能力。它们的抗氧化能力都是随着浓度的增大而上升,在实验浓度范围内达到最大值。说明厚朴叶的两种提取方法所提取的物质均有良好的抗氧化活性,抗氧化能力的大小顺序为:超声辅助提取法>药典提取法。