目的：研究在实验性急性坏死型胰腺炎(ANP)中，大鼠肠屏障功能(IBF)障碍的发生发展和褪黑素(MT)对IBF的保护作用，并试探讨其机制。 方法： 1.72只健康雄性SD大鼠随机分成急性坏死型胰腺炎组(ANP组)、褪黑素干预组(MT组)、假手术组(SO组)，每组各24只。采用胰胆管末端穿刺逆行注入5％牛磺胆酸钠(1ml/100g体重)制备ANP模型。SO组仅作剖腹术，并轻翻动胰腺组织后关腹。MT组于制模前30min腹腔注射褪黑素溶液50mg/Kg体重。ANP组和SO组则予以生理盐水，剂量及方法同MT组。造模后第4、12、24、48h分批处死动物，每个时点6只(暂不考虑实际操作过程中死亡的大鼠)。 2.各时点由下腔静脉抽血6～8ml，离心后留上层血清，置4℃冰箱备用。迅速取1mm3末端回肠若干块，于25g/L戊二醛溶液中固定，待行电镜检查。取部分胰头组织和末端回肠组织固定于10％多聚甲醛液，待行光镜和末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP原位缺口末端标记(TUNEL)法检查。 3.血清淀粉酶测定送检验科完成，分光光度法测血清D-乳酸，酶联免疫吸附分析法(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)测血清肠脂肪酸结合蛋白(IFABP)、巨噬细胞移动抑制因子(MIF)。 4.胰腺和末端回肠组织行常规病理学检查，TUNEL法测回肠上皮细胞凋亡情况，电镜下观察回肠组织超微结构变化。 5.计量资料采用均数±标准差(x±s)表示，应用SPSS12.0进行方差分析和秩和检验等处理。P＜0.05为差异有显著性意义。 结果： 1.血清淀粉酶：ANP组4h即开始升高，各时点水平均较SO组显著升高(P均＜0.01)，而MT治疗组各时点的淀粉酶水平较ANP组无显著性差异，但仍高于SO组(P均＜0.01)。 2.血清IFABP、D-乳酸水平：ANP组4b即开始升高，各时点较SO组均显著升高(P均＜0.01)，MT组各时点IFABP、D-乳酸的水平较ANP组有所下降(P均＜0.05)，但仍高于SO组(P均＜0.01)。 3.血清MIF:ANP组各时点水平较SO组均显著升高(P均＜0.01)，MT组各时点的水平较ANP组有所下降(P均＜0.05)，但仍高于SO组(P均＜0.01)。 4.光镜下SO组胰腺和回肠未见明显病理改变；ANP组各时点均有不同程度的胰腺和回肠粘膜病理改变，如光镜下SO组大鼠胰腺组织腺体小叶结构完整；ANP组可见大片胰腺灶状凝固性坏死；MT组胰腺坏死、出血明显减少。ANP组回肠柱状上皮细胞坏死、脱落；MT组较ANP组病变明显减轻，绒毛排列较整齐，肠腔中脱落细胞较少，间质充血水肿减轻。 5.TUNEL法提示SO组未见明显细胞凋亡，ANP组回肠上皮凋亡阳性细胞较多，以绒毛顶端为主，MT组回肠上皮凋亡阳性细胞较ANP组明显减少，但仍高于SO组。 6.电镜下SO组各时点组织超微结构未见明显变化，粘膜表覆上皮完整，细胞间连接结构正常，表面微绒毛丰富、规则，细胞质内线粒体、内质网丰富，形态正常：ANP组各时点回肠超微结构异常最明显，上皮细胞微绒毛排列紊乱且短矮，胞浆内线粒体明显扩张空泡化，MT组组织超微结构损伤较ANP组减轻。 结论： 1.ANP组发病早期即发生肠屏障功能(IBF)损害，伴有肠粘膜超微结构异常，病理改变明显，肠上皮细胞有不同程度的坏死和凋亡。提示ANP发病早期肠道上皮细胞凋亡和增生之间失去平衡是IBF障碍的病理机制之一。 2.ANP发病早期即有血清MIF升高，且其升高的趋势与肠屏障损害的进展基本一致，提示MIF参与了ANP的炎症过程，并与肠道损害的轻重呈正相关。 3.予MT干预，可以改善ANP发病后的肠道病理改变和超微结构异常，在一定程度上抑制肠上皮细胞凋亡；可以降低血MIF水平，从而有效保护肠屏障功能，其作用途径可能是通过抑制血MIF的产生从而抑制炎症反应。