论文部分内容阅读
目的:1.探讨摄涕止鼽方对肺肾气虚型AR患者鼻腔黏膜TLR2和TLR4表达水平及血清IL-4和IFN-γ水平的影响。2.建立变应性鼻炎大鼠模型,使用LPS进行干预,探讨摄涕止鼽方对AR模型大鼠鼻腔黏膜TLR4表达水平及血清IL-4和IFN-γ水平的影响。方法:1.选择肺肾气虚型AR患者为研究对象。将受试者随机分为试验组和安慰剂组,试验组16人,安慰剂组16人。试验组口服摄涕止鼽方(黄芪、白术、防风、肉桂、细辛、干姜、制白附子)清膏治疗,安慰剂组口服安慰剂免煎颗粒治疗,疗程均为28天。在治疗前和治疗第28天对变应性鼻炎整体症状、鼻塞、流涕、喷嚏、鼻痒的严重程度进行VAS评分,并进行RQLQ评分。在治疗前后使用ELISA检测受试者血清IL-4和IFN-γ水平,免疫组化和Western Blot检测下鼻甲黏膜TLR2和TLR4表达水平。2.选择清洁级SD大鼠60只为研究对象,随机分成6组,A组(正常组)10只,B组(空白对照组)10只,C组(AR模型组)10只,D组(AR模型组+LPS)10只,E组(AR模型+中药)10只,F组(AR模型+LPS+中药)10只。AR模型制作:使用卵清蛋白(OVA)+Al(OH)~3对大鼠进行腹腔注射,隔天1次,连续7次,作为基础致敏,从实验第15天开始每天以OVA滴鼻,连续7天,激发AR症状,并进行症状积分评估,从实验第22天开始予以低浓度OVA滴鼻,隔天1次,连续9天,维持致敏。A组不施加任何干预。B组以生理盐水代替OVA进行腹腔注射和鼻腔激发。C组按照上述AR模型制作方式造模。D组在制作AR模型的基础上,在实验第22天使用LPS滴鼻,每天1次,连续9天。E组在制作AR模型的基础上,在实验第22天,使用摄涕止鼽方清膏灌胃,每天1次,连续9天。F组在D组的基础上,在实验第22天,使用摄涕止鼽方清膏灌胃,每天1次,连续9天。HE染色观察大鼠鼻中隔黏膜组织形态变化,ELISE检测大鼠血清中IL-4和IFN-γ水平,免疫组化染色观察大鼠鼻中隔黏膜TLR4表达,Western Blot检测大鼠鼻腔外侧壁黏膜TLR4表达水平。结果:1.VAS和RQLQ评分:试验组治疗后VAS和RQLQ评分较治疗前降低,安慰剂组治疗后VAS和RQLQ评分较治疗前降低。试验组和安慰剂组治疗前VAS和RQLQ评分比较无显著性差异,试验组和安慰剂组治疗后VAS和RQLQ评分比较无显著性差异。ELISE检测:试验组治疗后血清IL-4水平较治疗前降低。试验组治疗后血清IL-4水平比安慰剂组治疗后血清IL-4水平低。试验组与安慰剂组治疗前后血清IFN-γ比较无显著性差异。免疫组化检测:试验组和安慰剂组治疗前后下鼻甲黏膜均表达TLR2和TLR4。Western Blot检测:安慰剂组治疗后鼻腔黏膜TLR2蛋白表达水平较安慰剂组治疗前升高。试验组治疗后鼻腔黏膜TLR2蛋白表达水较安慰剂组治疗后低。安慰剂组治疗后鼻腔黏膜TLR4蛋白表达水平较安慰剂组治疗前升高。2.变应性鼻炎大鼠模型行为学评分均高于5分。模型大鼠鼻中隔黏膜HE染色见单核细胞及嗜酸性粒细胞浸润,LPS滴注大鼠鼻腔后见鼻中隔黏膜有中性粒细胞浸润。ELISE检测:E组血清IL-4水平较C组低,F组血清IL-4水平较D组低。各组血清IFN-γ比较无显著性差异。免疫组化染色:各组鼻中隔黏膜均表达TLR4。Western Blot检测:各组鼻腔外侧壁黏膜TLR4表达水平组间比较无显著性差异。结论:1.肺肾气虚型AR急性发作或加重的自然病程会导致鼻腔黏膜TLR2和TLR4水平升高。2.摄涕止鼽方能抑制肺肾气虚型AR患者鼻腔黏膜TLR2和TLR4水平的升高。3.摄涕止鼽方能降低肺肾气虚型AR患者血清IL-4水平。4.AR大鼠模型制作成功。5.摄涕止鼽方能降低AR大鼠模型血清IL-4水平。6.摄涕止鼽方能降低LPS干预后AR大鼠模型的血清IL-4水平。