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研究背景：血管钙化，在糖尿病和尿毒症患者中十分常见，与急性心肌梗死、血管顺应性下降、经皮血管成形术时夹层形成有关，血管钙化也被认为是心血管疾病的重要危险因素之一[1,2]。钙化的血管比正常血管更为僵硬，对血管舒张剂抵抗，更容易发生动脉粥样硬化斑块破裂和血栓形成，导致急性冠状动脉综合症等不良心血管事件的发生。心脏瓣膜部位发生钙化，是导致瓣膜性心脏病（valvular heart disease,VHD）的重要原因，VHD与心力衰竭的发生高度相关，并且是预后不良的重要因素。既往认为血管钙化的发生是伴随着年龄增加退行性变的钙盐被动沉积的过程，但是最近的研究表明血管钙化不是一个被动的、血管疾病终末期、退行性变的表现，而是一个主动的受到精确调控的过程，和骨生成有很多相似的地方[3]。血管钙化是在多种刺激因素下血管平滑肌细胞由收缩表型向成骨样细胞表型转化的过程[4]。研究目的：高糖刺激可以引起VSMCs向成骨样细胞表型转分化，引起成骨样细胞表型分子Cbfα-1和BGP表达升高，ALP活性增加[5]。高糖和葡萄糖代谢产物葡萄糖胺可以引起血管平滑肌细胞内质网应激，与动脉粥样硬化形成有关[6]。内质网应激可以引起未折叠蛋白反应（unfolded protein response, UPR），UPR包括IRE-1、ATF6和PERK三条途径[7]。其中内质网应激PERK途径在成骨细胞的发育成熟过程中发挥了重要作用。VSMCs是如何向成骨样细胞表型转化的机制还未完全阐明，本实验旨在揭示内质网应激PERK途径是否在高糖诱导VSMCs向成骨样细胞转分化过程中发挥作用。研究方法与结果：（1）原代培养的SD大鼠胸主动脉VSMCs，分为正常糖浓度组（5mmol/LD-葡萄糖），甘露醇渗透压对照组（5mmol/L D-葡萄糖+25mmol/L甘露醇），高糖组（30mmol/L D-葡萄糖），高糖+PERK siRNA干预组（30mmol/L D-葡萄糖+PERK siRNA转染），高糖+RNA干扰阴性对照组（30mmol/L D-葡萄糖+Scramble RNA转染）。分别作用48和72h。反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）及Western blot分别从mRNA和蛋白质水平检测不同时间点内质网应激相关分子GRP78、PERK、p-PERK、eIF2α、p-eIF2、ATF4的改变，以及成骨样细胞标志性分子-核心转录因子（Cbfα-1）、骨钙素（BGP）以及平滑肌细胞标志性分子α-SMA的改变情况。应用碱性磷酸酶（ALP）活性检测试剂盒检测ALP的活性。（2）与正常糖浓度和甘露醇渗透压对照组相比，在mRNA水平，高糖组和高糖+RNA干扰阴性对照组Cbfα-1、PERK、eIF2α、ATF-4表达升高(P＜0.05)，PERK-siRNA干预后其表达水平均降低(P＜0.05)，在蛋白质水平，Cbfα-1、PERK、p-PERK、eIF2α、p-eIF2α、ATF-4表达升高(P＜0.05)，PERK-siRNA干预后其表达均降低(P＜0.05)。高糖刺激VSMC后ALP活性升高(P＜0.05)，PERK-siRNA干预后其表达均降低(P＜0.05)。研究结论：内质网应激PERK途径在高糖诱导VSMCs由收缩表型向成骨样细胞表型转化中发挥作用，抑制PERK途径可以部分阻止这一转化过程。