轮状病毒作为婴幼儿腹泻的最主要病原体，它通过感染小肠的肠上皮细胞，导致腹泻,脱水及电解质紊乱，亦可引起心肌和脑损害发生，严重时导致死亡。在发展中国家每年可夺走约870,000名儿童生命。由于目前缺乏有效的治疗措施，故疫苗的应用被认为是控制本病流行的关键。作为研制疫苗的基础，熟悉全世界，特别是发展中国家轮状病毒的流行特征极为重要。本研究对重庆地区1998-2000年度秋冬季婴幼儿轮状病毒腹泻分子流行病学进行了调查，采用巢式RT-PCR和核苷酸序列分析方法进行分型。结果发现重庆地区1998-1999年度轮状病毒流行季节中流行的轮状病毒以G1型为主，占88%（44/50）；而1999-2000年度轮状病毒流行季节中G3型为主，占78.95%（30/38），在连续两年的监测中出现轮状病毒血清型的转变。研究中尚发现数例混合型，均为G1+G3型。此结果为今后疫苗的研制及评估提供了分子流行病学基础。 虽然美国已推出口服四价活疫苗，但在最迫切需要疫苗的发展中国家由于其临床试验结果显示免疫效果欠佳，加之价格较高，所以难免应用受限。发展灭活疫苗和亚单位疫苗也是出路之一，但是它们均不能提供内源性合成的蛋白质，因而不能产生在控制轮状病毒感染中起重要作<WP=8>用的细胞毒性T细胞（CTL）反应，故需研究更加完善的疫苗。DNA疫苗作为继减毒疫苗，基因工程疫苗之后的第三代疫苗，它能够有效地诱导全面免疫反应，尤其是特异性CTL反应，使其成为今后疫苗研制的首选。本研究已针对编码轮状病毒外壳蛋白VP7的基因片段构建了表达质粒，即将质粒pcDNA1/VP7中编码轮状病毒外壳蛋白VP7的全基因片段亚克隆到质粒pcDNA3.1上，构建为具有体内长期表达能力的真核表达质粒pcDNA3.1/ VP7。经裸DNA及脂质体包被的质粒DNA免疫小鼠后，滴鼻组和肌注组血清IgG水平较对照组明显升高。然而有趣的是，脂质体包被的质粒DNA经肌注接种后不仅血清IgG水平较对照组明显升高，而且血清IgA水平也较对照组明显升高。相反，裸DNA无论经鼻内还是肌注接种小鼠后，以及脂质体包被的质粒DNA滴鼻组均未能诱导血清IgA水平的升高。研究结果提示，脂质体在DNA接种中不仅作为质粒DNA疫苗的载体，而且起到免疫佐剂的作用。 经该脂质体包被的质粒DNA免疫小鼠后，肌注组血清IgA水平较对照组明显升高，提示该脂质体包被的DNA经肌肉注射途径接种可能对机体产生免疫保护。