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鹅膏菌属(Amanita)是蘑菇目(Agaricales)中的一个世界性广布的大属,其价值大,应用范围广。在开发新药,如抗肿瘤、抗菌、抗病毒、镇静或麻醉药等方面具有潜在的应用前景。因为它们与人类生活息息相关,所以历来受到菌物学家的重视。鹅膏菌属外生菌根真菌,是自然界中难培养、难以人工或半人工栽培的真菌,这使得鹅膏属真菌的研究滞后,且难以开发利用。豹斑鹅膏(Amanitapantherina)为鹅膏科(Amanitaceae)、鹅膏属(Amanita)、鹅膏亚属(subgen.Amanita)、鹅膏组(sect.Amanita),剧毒,其毒性为神经致幻型,可开发镇静及迷幻药。其在国内是否有分布一直还存在争议,本研究组近年连续在武定狮子山发现其个体。因此,本论文以武定狮子山为观测样点,对豹斑鹅膏的生态环境,菌丝体分离、鉴定和培养,自然条件下的人工接种三个方面进行了研究,主要研究结果如下:
1、生态环境研究表明,豹斑鹅膏一般生长在由栎和石栎等树木组成的阔叶林,或由松、冷杉、云杉及滇青冈等组成的针阔叶林中;其生长的土壤表层疏松、透气、潮湿,并且具有较厚的腐叶层,较高的有机质含量,丰富的矿物质养分,较小的容重,4.5—5.6的PH;子实体生长较适宜的天平均气温为18℃,光照强度为500-2500lux(主要是散射光和反射光),空气湿度为78.90%。这为鹅膏菌的人工或半人工栽培提供了理论依据和生境借鉴。
2、菌丝体培养的研究表明,子实体的菌褶部位最易诱导出菌丝体;用ITS分子标记鉴定其菌丝体,菌丝体与子实体的ITS(ITS1、5.8SrDNA、ITS2)序列长度都为591bp,且碱基序列完全相同,说明分离菌丝体来自豹斑鹅膏子实体;菌丝体最佳培养基为IPDM培养基,其PH值、葡萄糖浓度分别为5.4、20g/L,其最适培养温度为23℃;在IPDM培养基中添加外源激素如1.5ppm的6—BA,0.5ppm的NAA,0.5ppm的KT,对菌丝生长皆具有明显的促进作用,而IBA,2,4—D,GA3对菌丝生长的促进作用皆不明显,反而有抑制作用。
3、菌丝体的室内扩大培养及自然生境下的人工接种实验表明,豹斑鹅膏菌丝体在15%棉籽壳+15%麦麸+65%木屑的固体培养基上难以生长;但在20%麸皮(粉碎)、10-25%生境土壤(粉碎)+20%麸皮(粉碎)的固体及液体培养基上生长较好;将IPDM固体培养基培养的菌丝接种到野外自然生境下,没有污染的菌丝体在逐渐生长,但没有发育成子实体,菌丝体在野外的生长及发育有待于进行更深入的研究。