草酸诱导哈密瓜果实采后耐冷性的作用机理

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哈密瓜(CucumismeloL.)属于典型的呼吸跃变型果实,采后成熟衰老迅速,腐烂损失非常严重。低温冷藏能有效抑制果实采后腐烂和品质下降,但哈密瓜在低温下贮藏易发生冷害。采用不同处理方法对哈密瓜采后冷害的调控已有研究报道。然而,草酸作为一种非生物诱抗剂,增强果实低温耐受性的作用机理则尚不十分清楚。因此本研究使用外源草酸(Oxalicacid,OA)处理采后哈密瓜果实,利用RNA-Seq技术手段研究草酸对哈密瓜采后的低温耐藏性、抗氧化系统、膜脂代谢及脯氨酸代谢的影响,阐释草酸诱导哈密瓜采后抗冷性,缓解采后冷害的作用机理。主要成果如下:1、以’西州密 25 号’哈密瓜(Cucumi melo var.reticulatus Naud.)为原料,筛选适宜的草酸浓度处理模式。与对照相比,10、15、20mmol/L草酸处理均抑制冷藏哈密瓜果实硬度和维生素C含量下降,其中15 mmol/L的草酸处理效果较好。贮藏第42天,15 mmol/L草酸处理果实的呼吸速率、细胞膜渗透率及冷害指数较低,分别为6.05 mg · Kg · h-1、13.72%和0.55。因此,15 mmol/L的草酸溶液作为降低哈密瓜果实采后冷害的处理模式。2、对果实施加外源草酸后对果皮进行RNA-Seq分析。结果表明,草酸处理上调活性氧清除途径的相关基因(3个POD基因、1个MDHAR基因、2个SOD基因、1个APX基因和1个GR基因)。降低膜脂氧化途径中3个LOX基因和1个PLD基因的转录水平。提高脯氨酸合成途径中1个P5CS基因和1个P5CR基因的转录水平,降低1个ProDH基因的转录水平,对GDH基因的转录水平影响较小。草酸处理上调可溶性糖累积途径中的1个SPS、1个SuSy及1个Glu基因的转录水平,对其他基因无影响。3、草酸处理提高冷藏前期哈密瓜APX,MDHAR和DHAR的活性,提高贮藏中期POD,GR和SOD的活性及CmGR,CmAPX和CmPOD的表达水平。草酸处理的哈密瓜果皮AsA和GSH的含量及AsA/DHA和GSH/GSSG比值均高于对照,共同作用降低MDA含量和膜渗透率及H2O2和O2-的生成量,调控活性氧代谢的平衡,减轻低温胁迫下哈密瓜的冷害。4、草酸处理降低哈密瓜LOX和PLD活性及CmLOX和CmPLD的表达水平。促进棕榈酸(C16:0)和硬脂酸(C18:0)的含量(除35天之外)下降,提高亚油酸(C18:2)、亚麻酸(C18:3)和二十碳四烯酸(C20:4)的含量,抑制油酸(C18:1)含量下降,提高不饱和指数和不饱和度。维持较高的膜脂不饱和程度,减轻冷害的生理效应。5、草酸处理短时诱导与渗透调节物质密切相关的转录因子Cm-CBF1表达上升,且提高P5CS活性和CmP5CS的表达水平,推测转录因子Cm-CBF1可能通过激活CmP5CS基因表达参与草酸对哈密瓜脯氨酸代谢的调控。同时草酸处理促进ProDH活性和CmProDH表达水平下降,共同作用使脯氨酸的含量积累到一定程度,降低哈密瓜对低温的敏感性。
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