论文部分内容阅读
丹参水溶性酚酸类成分具有很强的清除自由基能力,其单体成分清除超氧阴离子(O2-·)活性尚需进一步研究;目前清除O2-·活性的体外评价方法很多,但相同样品分析方法不同,其评价结果相去甚远。本论文对四种文献报道的清除O2-·活性评价方法进行研究与改进,采用改进的方法对丹酚酸单体成分进行清除O2-·活性分析,确立丹参酚酸类化合物清除O2-·活性的评价体系;为筛选高活性酚酸类化合物提供参考方法和阐明丹酚酸单体成分药理作用提供依据。以丹酚酸B为研究对象,采用氮蓝四唑光照法、邻苯三酚自氧化法、黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶-细胞色素C、还原型辅酶Ⅰ-吩嗪硫酸甲酯-氮蓝四唑体系等4种清除O2-·活性体外评价体系,对丹酚酸B清除O2-·活性进行分析,对各体系实验条件进行了优化,比较了各体系的重现性及灵敏度,并对丹酚酸A、B,迷迭香酸,紫草酸,原儿茶醛等5种主要丹酚酸类化合物的清除O2-·活性进行了系统评价。研究结果表明:分析检测条件对每个评价体系评价丹酚酸B清除O2-·活性的测定结果均有较大影响,优化后的体系重现性和灵敏度都有了较大的改善;建立了各体系评价丹酚酸类化合物的最佳实验条件。分别对5种丹酚酸类化合物的清除O2-·活性进行分析,结果表明:5种丹酚酸均有较强的清除O2-·能力,并且存在明显的量效关系。通过对5种丹酚酸在四种评价体系中的活性分析结果比较,证实了不同评价体系测定结果存在较大差异性,因此,建立丹酚酸类化合物清除O2-·活性最佳评价体系是十分必要的。综合比较各评价体系分析结果的重现性及灵敏度,氮蓝四唑光照法为最佳,因此确定该法为评价丹酚酸类化合物清除O2-·活性的最适体系,5种丹酚酸类化合物的清除O2-·活性分析结果为:迷迭香酸>丹酚酸A>丹酚酸B>原儿茶醛>紫草酸≈芦丁。此外,在黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶-细胞色素C体系中,丹酚酸A、紫草酸、迷迭香酸均对黄嘌呤氧化酶活性表现出较强的抑制作用,初步判断该化合物有可能成为治疗高尿酸血症和痛风的药物,可对其做深入研究。