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目的: 近视是指在眼调节放松的状态下，平行光线经眼球屈光系统后聚焦在视网膜之前的一种屈光不正状态。近视作为全世界范围内最常见的屈光不正，近年来发生率呈快速增长的趋势。近视可引起一些眼部并发症和视力损害，比如不同程度的黄斑变性、后巩膜葡萄肿等等。近视可分为轴性近视和屈光性近视，其发生是环境和遗传等多因素共同作用的结果，但目前其确切的发病机制仍在不断探索中，尚缺乏有效的、从病因学上入手的防治措施。因此，近视的相关研究势在必行。 我们前期通过 RNA-sequence结果分析形觉剥夺 2天、4周的小鼠近视眼模型巩膜转录组，发现巩膜内过氧化物酶体增殖物激活受体-α (peroxisome proliferators-activated receptors-α，PPARα）信号通路功能下调，PPARα及其部分下游靶基因表达下降，而其他 PPAR 受体亚型改变不明显，因此可提示小鼠近视诱导过程中，巩膜 PPARα 可能与近视的形成及细胞外基质重塑有关。为了进一步明确 PPARα 在和近视和屈光发育中的作用，我们课题组从美国Jackson Lab引进了PPARα全身敲除小鼠，发现PPARα敲除后小鼠出现明显的近视，而且巩膜胶原减少。此外我们还发现，在三色豚鼠球后结膜下注射 PPARα激动剂 Fenofibrate（非诺贝特），可抑制三色豚鼠形觉剥夺近视形成。 综上实验结果： 1) RNA-sequence分析发现形觉剥夺后小鼠巩膜PPARα 及其部分下游靶基因表达下调； 2）PPARα 全身敲除小鼠出现明显的近视； 3）PPARα激动剂非诺贝特可抑制豚鼠形觉剥夺近视形成； 我们推测PPARα 可能参与了近视的形成。鉴于我们又发现PPARα全身敲除小鼠巩膜胶原合成减少，提示 PPARα 可能影响巩膜胶原的合成。综上所述，我们提出科学假设：巩膜 PPARα通过调控巩膜胶原合成，从而引起近视。为了证明此假设，我们将在前期实验的基础上，先证实巩膜 PPARα 参与调控巩膜胶原合成从而引起近视，然后证明视网膜PPARα 不参与近视调控从而来反向证明巩膜 PPARα 对调控巩膜胶原及近视的作用。通过此项研究，我们有望明确巩膜PPARα在屈光发育和近视形成中的作用及对巩膜胶原合成的调控方式，从而阐明近视发生发展的机制及胶原合成调控机制，为寻找可能的特异性近视干预药物提供新的理论依据。 方法： 1.巩膜PPARα参与调控巩膜胶原合成从而引起近视 本部分实验采用 4 周龄的 PPARα 全身敲除小鼠（PPARα-KO）为实验动物，利用 EIR测量屈光，OCT检测眼轴长度、前房深度、玻璃体腔深度、晶状体厚度等眼球参数，淘汰眼球畸形、眼球发育不全、角膜溃疡等小鼠，筛选出双眼屈光差值小于5.0 D，营养条件良好，体重一致约10±2g的小鼠纳入实验。将筛选出来符合条件的小鼠随机分为三组，分别是 PPARα-KO组（NC 组），双眼不做任何处理；AAV8-Vector 组（CT 组），右眼 Tenon’s 囊下注射包装空载体的 Ⅷ 型腺相关病毒组（AAV8-Vevtor）病毒；AAV8-PPARα OE 组（OE组），右眼 Tenon’s 囊下注射包装PPARα 过表达载体的 Ⅷ 型腺相关病毒组（AAV8-PPARα），研究过表达巩膜PPARα对 PPARα-KO小鼠屈光、眼轴长度、前房深度、玻璃体腔深度、晶状体厚度等参数的影响及巩膜胶原的影响。病毒注射后 2 周、4 周再次利用 EIR 测量小鼠屈光，利用OCT检测小鼠眼轴长度、前房深度、玻璃体腔深度、晶状体厚度的变化，并在注射 4 周后对小鼠巩膜、角膜、视网膜等组织取材，利用 RT-PCR 检测小鼠巩膜 PPARα、PPARα下游靶基因SCD1、CAP2、AP2S1等 和 Ⅰ 型胶原在mRNA水平的变化。 2.明确视网膜PPARα是否参与小鼠屈光发育和近视形成 利用PPARα-flox小鼠（该品系小鼠在位于PPARα基因的第4外显子两端插入有flox序列）与视网膜特异表达Cre（Six3-Cre）小鼠杂交获得视网膜特异敲除PPARα的Cre阳性小鼠（Six3CrePPARαfl/fl）及Cre阴性的对照小鼠（PPARαfl/fl）两种基因型小鼠，当小鼠4周龄时利用EIR测量屈光，OCT检测眼轴长度、前房深度、玻璃体腔深度、晶状体厚度等眼球参数，淘汰眼球畸形、眼球发育不全、角膜溃疡等小鼠，筛选出双眼屈光差值小于5.0 D，营养条件良好，体重一致约10±2g的小鼠纳入实验，观察视网膜特异性敲除对屈光的影响。在小鼠6周龄、8周龄时再次利用EIR检测小鼠屈光的变化，利用OCT检测小鼠眼轴长度、前房深度、玻璃体腔深度、晶状体厚度等参数的变化，并在小鼠8周龄时通过RT-PCR检测小鼠视网膜PPARα在mRNA水平的变化。 结果： 1.PPARα KO小鼠巩膜过表达PPARα后对胶原的作用及近视的影响 （1）PPARα-KO小鼠实验组右眼Tenon’s囊下注射AAV8-PPARα后2周和4周，与对侧眼相比屈光没有差异，与CT组及NC组相比，屈光也没有出现明显的变化。 （2）PPARα-KO小鼠实验组右眼Tenon’s囊下注射AAV8-PPARα后2周和4周，与对侧眼及 CT组、NC相比，眼轴长度、角膜厚度、玻璃体腔深度、前房深度、晶状体厚度等眼球参数没有明显的变化。 （3）PPARα-KO小鼠实验组右眼Tenon’s囊下注射 AAV8-PPARα后 2周和 4周，与对侧眼及CT组、NC相比，注射AAV8-PPARα的右眼巩膜PPARα在mRNA水平表达明显升高，而巩膜Ⅰ型胶原及PPARα下游靶基因SCD1、CAP2、AP2S1等基因表达水平没有明显变化。 2.小鼠视网膜特异敲除PPARα后对屈光发育及眼轴长度等眼球参数的影响 （1）PPARα 视网膜特异性敲除小鼠（Six3CrePPARαfl/fl）视网膜 PPARα 的量在mRNA水平明显下调。 （2）PPARα视网膜特异性敲除小鼠（Six3CrePPARαfl/fl）4周龄、6周龄、8周龄时相比较于同窝的PPARαfl/fl 小鼠，屈光没有明显变化；眼轴长度、角膜厚度、玻璃体腔深度、前房深度、晶状体厚度等眼球参数没有明显的变化。 结论： PPARα-KO 小鼠出现近视但眼轴延长。PPARα 视网膜特异敲除后屈光和轴长度、角膜厚度、玻璃体腔深度、前房深度、晶状体厚度等眼球参数没有明显变化，提示视网膜 PPARα 减少不影响小鼠的屈光发育。巩膜过表达 PPARα 不影响小鼠的屈光发育和巩膜胶原的表达，提示可能过表达不能真正恢复 PPARα 的功能或者巩膜PPARα不参与近视的形成。