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目的：氯胺酮-NMDA受体非竞争性拮抗药,已用于小儿麻醉,癌性疼痛镇痛、抗焦虑和抗抑郁治疗等方面。有研究发现氯胺酮呈剂量和时间依赖性的促使新生大鼠脑神经元变性、凋亡及坏死,并认为这是导致新生大鼠远期认知功能损害的主要原因,但氯胺酮对幼年期大鼠近期学习记忆功能有何影响尚不清楚,且氯胺酮诱发神经元凋亡的机制尚不明确。 方法：前期我们用微小RNA微阵列技术检测发现氯胺酮(30mg/kg)腹腔注射大鼠1次/天,连续7次,可致大鼠海马微小RNA-214(miR-214)表达明显下调,计算机分析及其他相关研究发现miR-214可明显负调控其靶基因PTEN(人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因)的蛋白质表达,而PTEN高表达可致细胞凋亡。因此本研究的目的是探讨氯胺酮对幼年期大鼠近期学习和记忆功能、神经元凋亡以及海马miR-214和PTEN表达的影响。方法50日龄SD大鼠随机分为氯胺酮1、2、3、4和生理盐水1、2共六组。氯胺酮1、3组:分别行30mg/kg或80mg/kg氯胺酮腹腔注射大鼠1次;氯胺酮2、4组:分别行30mg/kg或80mg/kg氯胺酮腹腔注射大鼠1次/天,连续7次;生理盐水1组:等体积0.9％生理盐水腹腔注射大鼠1次;生理盐水2组:等体积0.9%生理盐水腹腔注射大鼠1次/天,连续7次。每组大鼠最后一次给药结束后24小时,部分大鼠行Morris水迷宫实验检测认知功能;部分大鼠处死后经灌注固定,制作大脑石蜡切片,用TUNEL法检测大鼠脑神经元凋亡,用免疫组化法检测大鼠脑PTEN蛋白表达;部分大鼠取新鲜海马组织,用qRT-PCR技术检测大鼠海马miR-214的表达,用westernblot检测大鼠海马PTEN蛋白表达。 结果：记忆功能明显损害(P<0.05);(2)氯胺酮1、2和3组大鼠海马CA1区神经元凋亡率无统计学差异(P>0.05),但氯胺酮4组大鼠海马CA1区神经元凋亡率明显增加(P<0.05),且发现所有氯胺酮组大鼠皮质及皮质下神经元凋亡率均明显增加(P<0.05);(3)免疫组化结果发现:氯胺酮1组大鼠海马CA1区神经元PTEN阳性百分率无统计学差异(P>0.05),而氯胺酮2、3及4组大鼠海马CA1区神经元PTEN阳性百分率明显增加(P<0.05),且所有氯胺酮组大鼠皮质及皮质下神经元PTEN阳性百分率均明显增加(P<0.05);(4)westernblot结果显示:氯胺酮1、2和3组大鼠海马组织PTEN蛋白表达量无统计学差异(P>0.05),但氯胺酮4组大鼠海马PTEN蛋白表达量明显升高(P<0.05);(5)qRT-PCR检测证实氯胺酮4组大鼠海马组织miR-214表达量明显降低(P<0.05)。 结论:1.亚麻醉剂量氯胺酮单次或连续7次以及麻醉剂量氯胺酮单次应用对幼年期大鼠近期学习记忆功能无明显损害;2.麻醉剂量氯胺酮连续7次应用可致幼年期大鼠近期学习记忆功能明显损害;3.麻醉剂量氯胺酮连续7次应用诱导海马CA1区神经元凋亡可能是其导致幼年期大鼠学习记忆功能损害的原因之一;4.麻醉剂量氯胺酮连续7次应用致神经元PTEN高表达可能是其导致幼年期大鼠神经元凋亡的机制之一;5.氯胺酮致幼年期大鼠海马组织PTEN高表达可能与miR-214表达下调有关。