BMP-2/氰基丙烯酸复合生物胶修复大鼠下颌骨缺损的实验研究

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目的1.以壳聚糖为载体,将BMP-2、α-氰基丙烯酸酯正丁酯、β-甘油磷酸钠等复合成生物胶,研究观察其稳定性。制作Wistar大鼠下颌骨骨缺损动物模型,将复合生物胶植入大鼠下颌骨缺损动物模型中观察修复缺损的效果。2.研究探讨BMP-2/氰基丙烯酸酯复合生物胶对大鼠下颌骨骨缺损的止血、黏结固定、诱导成骨修复颌骨缺损的可行性,为临床应用提供实验依据。方法1.BMP-2/氰基丙烯酸复合生物胶的制备2.壳聚糖温敏性水凝胶的制备。3.大鼠下颌骨矩形骨缺损动物模型的制备。4.将大鼠随机分为实验组、对照组、空白组。实验组植入BMP-2/氰基丙烯酸复合生物胶,对照组植入壳聚糖温敏性水凝胶,空白组不植入任何材料。创口分层缝合。术中观察BMP-2/氰基丙烯酸复合生物胶止血、黏结固定等。5.下颌骨标本处理及检测:术后3、6、9周每组各处死6只动物。标本大体观察,各组下颌骨标本拍摄软X线片,观察其缺损骨修复情况。组织学观察:不同时间的标本固定后,用EDTA液脱钙4周,HE染色、石蜡包埋做连续切片,厚度为4μm,光学显微镜观察。6.统计学分析:测量软x线片,配合使用Image Pro Plus6.0软件计算各组大鼠骨缺损面积(A),进行数据分析。用SPSS17.0软件对各组间数据进行处理,采用单因素方差分析(One Way ANOVE)进行统计学分析。结果1.以壳聚糖为载体,将BMP-2、α-氰基丙烯酸酯正丁酯、甘油磷酸钠等复合成生物胶为半固态状胶冻状、流动性差、具有弹性的凝胶。2.壳聚糖温敏性水凝胶为淡黄色清亮液体,流动性差可,在37℃水浴,时长约1min可凝固,呈胶冻状。3.术中实验组植入的BMP-2/氰基丙烯酸复合生物胶表面形成膜状结构覆盖创伤及周围部位,止血及固定效果良好。4.试验过程中各组大鼠均未出现排异反应,成骨活跃,术后3、6、9周软X线大体观察可见实验组下颌骨骨缺损处密度大于其他两组,其缺损区域缩小。6、9周后实验组下颌骨骨缺损区域小于对照组。统计学分析植入后3、6、9周时,实验组骨缺损面积均低于对照组及空白对照组(P<0.05),说明BMP-2/氰基丙烯酸复合生物胶对颌骨缺损修复有显著作用。组织学观察:术后3周时实验组骨缺损周围除有新生毛细血管、成骨细胞、破骨细胞还可发现有少量的淋巴细胞;术后6周时实验组骨缺损区毛细血管和胶原纤维减少,周围有新骨长入且新生骨量明显高于同期对照组和空白对照组;术后9周时实验组骨缺损区可见大量新骨形成。结论BMP-2/氰基丙烯酸复合生物胶具有良好的生物相容性及骨诱导性,对大鼠颌骨缺损修复再生具有显著的促进作用,并且生物安全性好,修复颌骨缺损的效果好,具有良好的临床应用前景。
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