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目的:利用Caco-2细胞单层模型研究芒果苷跨膜转运的影响因素,筛选促进芒果苷吸收的方法和手段。 方法:(1)建立Caco-2细胞单层模型,通过跨膜电阻测定和荧光素钠的通透率对单层模型的完整性与通透性进行评价。(2)考察芒果苷、芒果苷苷元、高芒果苷、槲皮素、没食子酸等药物及羟丙基-β-环糊精、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)对Caco-2细胞的急性毒性反应。(3)建立高效液相色谱法测定样本中芒果苷的方法,测定样品中芒果苷的浓度。(4)通过Caco-2细胞单层模型考察芒果敢的转运。(5)通过Caco-2细胞单层模型考察芒果叶部分成分芒果苷苷元、高芒果苷、槲皮素、没食子酸对芒果苷跨膜的影响。(6)通过Caco-2细胞单层模型考察常用制剂辅料羟丙基-β-环糊精、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)对芒果苷跨膜转运的影响。 结果:(1) Caco-2细胞单层模型的跨膜电阻大于250Ω·cm-2,荧光素钠的累积通透率小于4.8μg·h-1·cm-2。(2)在实验浓度范围内,芒果苷、高芒果苷、芒果苷苷元、槲皮素、没食子酸及羟丙基-β-环糊精、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮等对Caco-2细胞无急性毒性实验。(3)实验样品中芒果苷浓度的测定方法为:流动相为甲醇-0.1%冰醋酸(35:65);流速1ml·min-1;柱温35℃;检测波长258nm。(4)芒果苷在各个实验浓度:50μg·ml-1、100μg·ml-1、310μg·ml-1、600μg·ml-1下的表观渗透系数 Papp(×10-8 cm·sec-1)分别为:AP→BL,1.414±0.915、2.271±1.351、2.632±1.576、3.571±1.440,BL→AP,2.632±2.35、3.501±2.433、4.765±3.761、7.178±5.796,经统计学分析各浓度的吸收外排均无显著性差异。(5)芒果苷苷元、高芒果苷、槲皮素、没食子酸分别在高、中、低浓度下,芒果苷的转运表观渗透系数Papp(×10-8cm·sec-1)均具有明显变化,具体结果如下,芒果苷苷元:AP→BL,350.877±15.897、526.316±33.601、157.895±11.930;BL→AP,175.439±14.763、350.877±15.727、100.263±17.890,统计学分析,与对照组具有显著性差异;高芒果苷:AP→BL,35.088±7.151、52.632±16.996、5.263±3.273,BL→AP,70.175±8.398、35.088±6.685、17.544±4.533,统计学分析,与对照组具有显著性差异;槲皮素:AP→BL,104.35±15.775、42.63±7.457、52.63±8.935,BL→AP,70.170±10.397、32.630±15.621、25.090±7.991,统计学分析,与对照组比较具有显著性差异;没食子酸:AP→BL,52.632±9.887、17.540±3.479、13.045±1.012;BL→AP,17.534±5.671、7.363±3.714、8.772±3.340,统计学分析,在高浓度没食子酸存在下,芒果苷的表观渗透系数与对照组比较具有显著性差异。(6)常用辅料羟丙基-β-环糊精,聚乙二醇4000,聚乙二醇6000,聚乙烯吡咯烷酮对芒果苷的转运也存在一定影响。其中以羟丙基-β-环糊精较为显著,羟丙基-β-环糊精对芒果苷转运表观渗透系数Papp(×10-8cm·sec-1)影响结果如下:AP→BL,10.297±2.397、5.138±4.557、2.822±1.478,BL→AP,1.823±1.345、3.339±2.897、4.69±3.478,统计学分析,在高浓度下,羟丙基-β-环糊精对芒果苷吸收的表观渗透吸收存在显著差异。 结论:芒果苷在过饱和浓度、饱和浓度及非饱和浓度下,表观渗透系数Papp<1×10-6,为吸收不良药物,吸收率小于20%,各浓度下吸收量及吸收速率没有明显差异,推测其转运存在载体的参与,且具有饱和显著,经计算其表观渗透率PDR均小于1.5,推测芒果苷的跨膜转运以外排为主;芒果苷苷元、高芒果苷、槲皮素、没食子酸在高、中、低浓度条件下,对芒果苷的转运存在一定影响,芒果苷转运表观渗透系数均有显著提高,且PDR<1.5,表明各个化合物能够改变芒果苷的转运方向,促进芒果苷的吸收;药用辅料羟丙基-β-环糊精、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、聚乙烯吡咯烷酮能够增加芒果苷的溶解度的同时,对芒果苷的转运也存在一定的影响,羟丙基-β-环糊精,聚乙二醇4000对芒果苷的转运存在显著影响,能够改变芒果苷的转运方向。